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上篇 医学免疫学实验方法3

第一章 免疫器官的获取与观察3

第二章 非特异性免疫功能检测4

实验一 吞噬细胞的吞噬实验4

一、中性粒细胞的吞噬作用4

二、巨噬细胞的吞噬作用5

实验二 血清补体的测定7

实验三 细胞因子的检测8

一、生物检测法8

二、免疫学检测法9

三、分子生物学检测法10

第三章 体液免疫功能检测11

实验一 凝集反应11

一、直接凝集反应11

二、间接凝集反应12

三、金黄色葡萄球菌A蛋白协同凝集试验14

实验二 免疫扩散与免疫电泳技术15

一、免疫扩散试验16

二、免疫电泳技术18

实验三 免疫标记技术22

一、免疫酶技术22

二、免疫荧光技术25

三、放射性核素标记技术27

四、免疫胶体金标记技术27

五、生物素-亲和素免疫测定法29

实验四 单克隆抗体的制备及应用31

一、杂交瘤技术的原理及流程31

二、McAb的应用32

第四章 流式细胞仪的基本原理及其在免疫学中的应用34

一、流式细胞仪的基本工作原理34

二、流式细胞仪使用样品的准备36

三、免疫荧光探针（染料）37

四、流式细胞仪资料显示基本形式39

五、流式细胞术免疫学检测的影响因素和质量控制40

第五章 细胞免疫功能检测41

实验一 免疫细胞的分离41

一、外周血单个核细胞的分离41

二、淋巴细胞的分离纯化42

三、T细胞和B细胞的分离43

四、T细胞亚群的分离43

五、不同细胞分离方法的综合评价44

实验二 E玫瑰花环形成试验44

实验三 T淋巴细胞亚群检测45

一、间接免疫荧光法45

二、免疫酶化学法46

三、免疫荧光法46

四、流式细胞仪检测46

实验四 淋巴细胞功能检测46

一、T细胞功能检测46

二、T细胞亚群功能检测48

三、B细胞功能检测49

实验五 混合淋巴细胞反应49

实验六 NK细胞活性检测50

一、乳酸脱氢酶释放试验50

二、同位素释放法51

三、荧光分析法52

下篇 医学微生物学实实验方法55

第六章 细菌形态学检查55

实验一 显微镜的使用与保护55

一、显微镜的结构55

二、显微镜的使用方法及注意事项56

三、显微镜的维护58

实验二 细菌基本形态及特殊结构观察58

实验三 细菌不染色标本检查59

一、悬滴法59

二、压滴法59

三、暗视野显微镜检查法60

实验四 细菌染色61

一、细菌标本片制作62

二、单染色法62

三、革兰染色法62

四、抗酸染色法63

五、荚膜染色法64

六、鞭毛染色法65

七、芽胞染色法66

第七章 细菌培养68

实验一 培养基的制作68

一、肉汤培养基68

二、肉汤琼脂固体培养基69

三、肉汤琼脂半固体培养基69

实验二 细菌的基本培养法及生长现象观察69

一、分离培养法69

二、纯种细菌接种法72

实验三 细菌的生化反应73

一、糖发酵试验74

二、V-P试验74

三、甲基红试验74

四、枸橼酸盐利用试验75

五、靛基质（吲哚）试验75

六、尿素分解试验75

七、硫化氢试验76

八、触酶（过氧化氢酶）试验76

九、氧化酶试验76

第八章 外界因素对细菌的影响81

实验一 物理因素对细菌的影响81

一、温度和湿度对细菌的影响81

二、紫外线对细菌的影响85

三、滤菌器过滤除菌86

四、无菌室及无菌工作台的原理及其使用86

实验二 化学因素对细菌的影响88

一、常用化学消毒剂的杀菌试验88

二、化学消毒剂的效力测定89

实验三 生物因素对细菌的影响90

一、药物敏感试验91

二、细菌素的测定92

三、噬菌体的噬菌作用93

第九章 细菌的变异96

实验一 L型细菌的检查96

实验二 Ames试验96

实验三 细菌质粒的提取和细菌转化试验97

一、细菌质粒DNA的提取97

二、细菌转化试验98

第十章 细菌毒力测定99

实验一 细菌内毒素测定——鲎试验99

实验二 外毒素对机体的毒性作用及抗毒素的中和作用99

实验三 大肠杆菌肠毒素试验100

一、LT测定法100

二、ST测定法100

实验四 细菌侵袭力测定101

一、荚膜的致病作用101

二、血浆凝固酶试验102

三、链激酶试验102

四、透明质酸酶试验103

第十一章 细菌在正常人体与环境中的分布104

实验一 细菌在人体分布的检测104

一、人体皮肤表层细菌的检查104

二、皮肤上细菌总数测定104

三、人体咽喉腔中细菌的检查105

四、牙垢中细菌的检查105

五、肠道正常菌群的检测105

实验二 环境中细菌分布的检测106

一、空气中细菌的检查106

二、土壤中细菌的检查107

三、地表水中细菌的检查108

四、物体表面细菌的检查109

第十二章 病原性球菌的微生物学检查110

实验一 临床标本化脓性球菌的分离与鉴定110

实验二 葡萄球菌的微生物学检查111

一、形态与培养特性111

二、血浆凝固酶试验111

三、耐热核酸酶试验111

四、葡萄球菌肠毒素测定112

五、耐药性菌株的耐药试验112

实验三 链球菌的微生物学检查113

一、形态与培养特性114

二、抗链球菌溶血素“O”试验114

实验四 肺炎球菌的微生物学检查115

一、胆汁溶菌试验115

二、Optochin敏感试验116

实验五 脑膜炎奈瑟菌的微生物学检查116

一、形态与培养特性116

二、脑脊液直接涂片检查117

三、动物毒性试验117

实验六 淋病奈瑟菌的微生物学检查117

一、淋病患者分泌物的微生物学检查117

二、淋病奈瑟菌的分离培养118

第十三章 肠道杆菌的分离与鉴定119

实验一 粪便标本中致病性肠道杆菌的分离与鉴定119

实验二 肥达反应122

实验三 痢疾志贺菌荧光菌球检查法123

实验四 耶尔森菌属的微生物学检查123

第十四章 其他细菌的微生物学检测127

实验一 霍乱弧菌的检测127

一、形态与培养特性127

二、荧光菌球试验129

三、制动试验129

四、霍乱弧菌生化反应129

实验二 副溶血性弧菌（嗜盐弧菌）的检测129

一、嗜盐性试验130

二、毒力试验130

实验三 气单胞菌属的检测130

一、形态与培养特性131

二、初步鉴定131

三、最后鉴定131

实验四 嗜血杆菌属及包特菌属的检测132

一、流感杆菌生物学特性132

二、百日咳杆菌生物学特性132

实验五 布氏菌属的检测133

一、形态与培养特性133

二、染料抑制试验134

三、凝集试验135

实验六 棒状杆菌属的检测136

一、形态与培养特性136

二、毒力试验137

实验七 分枝杆菌属的检测139

一、麻风杆菌的形态与染色139

二、结核杆菌的形态与培养特性139

三、结核病患者痰标本的直接检查139

四、结核杆菌检验程序140

实验八 需氧芽胞杆菌属的检测142

一、炭疽杆菌生物学特性142

二、炭疽杆菌串珠试验142

三、Ascoli反应143

四、枯草杆菌生物学特性144

实验九 厌氧芽胞杆菌属的检测144

一、破伤风杆菌和产气荚膜杆菌的形态与培养特性144

二、破伤风杆菌和产气荚膜杆菌动物试验145

三、Nagler反应145

四、肉毒杆菌的形态146

实验十 临床标本厌氧菌的分离鉴定146

一、厌氧菌感染的分离鉴定146

二、细菌的厌氧培养法148

实验十一 军团菌的检测149

一、形态与培养特性150

二、生化反应151

三、细菌学检验151

实验十二 假单胞菌属的检测152

实验十三 弯曲菌属的检测153

一、形态与培养特性153

二、生化反应153

三、致病弯曲菌检验程序155

第十五章 衣原体、立克次体、螺旋体、支原体的检测158

实验一 衣原体的检测158

一、鸡胚培养法158

二、荧光抗体染色法158

三、ELISA法159

实验二 立克次体的检测160

一、形态观察160

二、外斐反应160

实验三 螺旋体的检测161

一、螺旋体的形态观察161

二、钩端螺旋体的人工培养162

三、梅毒的血清学试验163

实验四 支原体的检测166

一、支原体的分离培养166

二、肺炎支原体冷凝集试验167

第十六章 真菌的常规检验169

实验一 真菌的形态观察169

一、基本形态169

二、染色标本制作171

实验二 真菌的培养172

一、沙氏琼脂斜面培养法172

二、真菌小培养法173

三、真菌菌落观察174

实验三 真菌毒素的鉴定175

一、产霉菌株荧光反应测定175

二、黄曲霉毒素抑菌试验175

第十七章 病毒学检查178

实验一 病毒的分离培养178

一、标本处理178

二、动物接种法178

三、鸡胚培养法182

四、组织培养法185

实验二 血凝及血凝抑制试验188

实验三 病毒的血清学反应189

一、中和试验189

二、补体结合试验192

三、酶联免疫吸附试验194

实验四 病毒抗原的检测196

一、免疫荧光技术196

二、免疫酶染色198

三、免疫酶斑点试验199

四、免疫印迹试验199

实验五 病毒核酸检测技术199

一、核酸杂交199

二、聚合酶链反应201

实验六 病毒感染的细胞包涵体检查203

一、核内包涵体203

二、核内和浆内包涵体203

三、胞质内包涵体203

第十八章 微生物鉴定的自动化技术204

一、微生物数码鉴定法204

二、自动化的微生物鉴定和药敏试验分析系统204

三、使用自动化鉴定仪的局限性205

常用缩略语206