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目录1

第一章 取样1

一、取样前的准备2

（一）仪器准备2

（二）性能检查2

（三）配制各种培养基和试剂2

（四）取祥前的现场记录3

（二）海洋、港湾取样地点的选择4

（一）采淡水（河水、湖泊水等）样品的地点选择4

二、取样地点的选择4

（三）沉积物取样地点的选择5

三、水样采集5

（一）采水器6

（二）自来水样的采集11

四、沉积物的采集11

（一）曙光（HNM1-2型）采泥器12

（二）弹簧采泥器13

（三）柱状采样管15

五、附着样品的采集18

（一）水中沉降附生玻片法18

（二）底埋玻片法18

（三）毛细管底埋法19

六、样品的暂时保存和运输20

第二章 水生微生物的分离与纯化22

一、培养基的配制22

（一）培养基配制的基本原理22

（二）配制培养基的一般过程及注意事项29

（三）无菌水、无菌海水和陈海水的制作33

（四）平板和斜面培养基制备33

（五）营养琼脂培养基、2216E培养基和特殊用途培养基的制备34

二、灭菌方法37

（一）物理灭菌法37

（二）化学灭菌法47

三、无菌操作48

（一）船上微生物实验室、无菌室及其器具48

（二）基本操作技术49

（一）器具及设备53

四、分离与纯化培养53

（二）十倍稀释分离法56

（三）平板划线法58

（四）倒平板法和平板涂布法60

（五）单细胞分离法62

（六）超滤膜分离法66

五、不同类型微生物分离方法68

（一）厌氧细菌的分离和无氧装置68

（二）芽孢杆菌的分离72

（三）海洋发光细菌的分离培养73

（四）海洋固氮菌的分离76

（五）硝化细菌的富集培养和分离80

（六）反硝化细菌的富集培养与分离84

（七）硫杆菌的分离培养86

（八）脱硫弧菌的富集、分离、纯化培养90

（九）磷细菌的分离94

（十）石油微生物种群的分离96

（十一）分解油脂细菌的分离98

（十二）几丁质分解菌的分离99

（十三）铁细菌富集分离及形态观察102

（十四）绿菌属（Chlorobium）的富集培养及分离107

（十五）着色菌属（Chromatium）或称红硫菌属的分离与纯氏培养109

（十六）红螺菌属（Rhodospirillum）的富集培养与分离112

（十七）红色假单胞菌属（Rhodopseudomonas）的富集培养与分离114

（十八）滤膜法分离检验水中大肠杆菌群115

（十九）水中沙门氏菌的分离118

（二十）水中志贺氏菌的检验和分离121

（二十一）水中葡萄球菌的分离与观察127

（二十二）水中粪链球菌群的增菌培养与分离129

（二十三）水中霍乱弧菌的分离检验131

（二十四）水中缘脓杆菌的分离检验136

（二十五）从泥样中分离放线菌138

（二十六）从沉积物中分离霉菌140

（二十七）从水、泥和生物体中分离酵母菌141

（二十八）噬菌体的分离144

第三章 水生微生物的细胞形态观察148

一、显微镜与显微摄影148

（一）普通光学显微镜148

（二）其他光学显微镜152

（三）电子显微镜157

（四）显微镜摄影法158

二、测微尺使用及微生物大小测量165

三、细菌运动的观察166

（一）暗视野观察法167

（二）悬滴法168

四、应用荧光显微镜辨别死、活菌168

五、单染色法169

六、革兰氏染色法171

七、抗酸染色法174

八、鞭毛染色法175

（一）常用法176

（二）利夫森氏（Leifson）法178

（三）户田法178

（四）费希尔氏和康恩氏（FisherandConn）法179

（五）卡萨尔斯氏（Casares）染色法179

九、芽孢染色法180

（一）孔雀缘-番红染色法180

（六）鞭毛染色的成败原因180

（二）科康氏（Conkon）改进沃茨氏（Wirtz）的染色法181

十、荚膜染色法181

（一）番红染色法182

（二）结晶紫硫酸铜改良染色法182

（三）刚果红美蓝染色法182

（四）结晶紫墨汁染色法183

十一、细胞壁染色法183

（一）鞣酸结晶紫染色法183

十二、异染粒染色法184

（二）磷钼酸染色法184

十三、类脂粒染色法185

十四、伴孢晶体染色法186

十五、核染色法187

十六、放线菌形态的观察188

（一）透明纸培养和观察法189

（二）印片观察法189

（三）盖片观察法190

十七、酵母菌形态的观察190

（二）子囊孢子的观察191

（一）水浸法观察酵母菌191

（三）假菌丝的观察192

（四）酵母菌死、活细胞的鉴别法192

（五）酵母菌的肝糖染色法192

（六）酵母菌的脂肪粒染色法193

十八、霉菌形态的观察193

（一）直接取菌观察法194

（二）载片培养观察法194

（三）染色法鉴别死、活孢子196

（四）玻璃纸培养观察法197

第四章 水生微生物的计数198

一、普通显微镜的直接计数198

（一）利用血球计数板计数199

（二）应用Peteroff-Hauser计菌器计数201

（三）采用目镜计数网计算202

（四）以涂片面积与视野面积之比估算203

（五）沉积物中细菌的稀释计算法203

二、应用超滤膜计数水生细菌205

（一）超滤膜萌发计数法205

（二）超滤膜直接镜检法206

三、荧光显微镜的计算法207

（一）水样中细菌的荧光计数法207

（二）泥样中细菌的荧光计数法208

四、平板计数及大肠杆菌群的检验209

（一）饮用水（自来水、深井水、泉水）的检验209

（二）游泳池水和海滨游泳场池水的检验214

（三）污水（河水、港湾水等）的检验216

（四）沉积物中的微生物平板计数219

（五）菌落计算原则220

五、泥样中厌氧菌的计数法221

六、泥样中放线菌、酵母菌和霉菌与总菌数的计数比较223

七、液体稀释法（MPN法）227

（一）反硝化细菌的计数229

（二）底泥中氨化细菌数量的测定238

（三）水中附着的纤维分解菌的数量测定239

（四）粪大肠杆菌群的数量测定241

八、应用标准比浊管测菌数247

九、使用分光光度计测定细菌数量249