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第一章 精液常规检查1

精液的获取和保存1

目录1

一、精液的采集2

二、精液的运送与保存2

精液检查4

一、精液的一般检查4

二、精液的显微镜检查8

计算机辅助精液分析10

一、定量分析14

第二章 精浆生化检查14

精浆果糖测定14

二、定性分析16

精浆柠檬酸测定16

一、吲哚法（WHO推荐方法）16

二、吡啶法18

精浆肉毒碱测定19

第三章 精液酶检查21

精浆α-1,4糖苷酶活性检测21

一、常用方法22

精浆酸性磷酸酶测定22

二、WHO推荐方法24

精子顶体内精氨酸酰胺酶活性测定27

精浆5α-还原酶活性测定29

第四章 精液其他特殊检查33

精浆锌的检测33

一、原子吸收法33

二、比色法34

精液脂质过氧化物SOD改良邻苯三酚法测定36

精子悬液活性氧类物质检测38

精子伊红Y染色42

第五章 活体精子检测技术42

精子伊红-苯胺黑染色43

精子尾部低渗膨胀试验43

精子水试验法45

第六章 精液中细胞成分的染色分析46

精液中白细胞检查46

一、正甲苯胺蓝过氧化物酶染色法46

二、邻甲苯胺法47

三、免疫细胞化学检测法47

精液中凋亡细胞检查50

一、瑞-吉染色法50

二、TUNEL法51

一、精子改良巴氏染色法54

精子形态学分析54

二、吉姆萨染色法57

三、Diff-Quik法57

四、改良Shorr染色法58

五、A+B快速染色法59

多重精子缺陷指数的计算60

第七章 精子功能检查63

精子-仓鼠卵穿透试验63

一、荧光植物凝集素法66

人工诱导顶体反应66

二、改良明胶膜玻片法68

精子染色质DNA完整性检测69

精子核苯胺蓝染色71

精子线粒体功能检测72

第八章 精子免疫学检测74

精子混合凝集反应法74

精子膜抗精子抗体免疫珠试验75

一、直接法76

二、间接法77

精浆酶联免疫吸附法78

精子表面凝集素受体检测80

人精浆免疫抑制因子-DF2测定82

第九章 精子-宫颈黏液相关检测84

宫颈黏液的收集和保存84

宫颈黏液的评估85

精子-宫颈黏液相互作用88

一、体内试验（性交后试验）88

二、体外试验91

第十章 细胞遗传学检查98

X染色质检查98

Y染色质检查99

人外周血细胞染色体制备技术100

染色体G-显带技术102

高分辨外周血染色体显带技术103

精子染色体制备技术104

一、人精子染色体的直接制备105

二、人精子-金黄地鼠卵离体受精制备精子染色体106

荧光原位杂交技术在精子染色体分析中的应用107

一、荧光原位杂交技术检测人染色体非整倍体107

二、双色荧光原位杂交技术检测人染色体非整倍体110

无精子因子的检测115

第十一章 基因检测115

睾丸决定基因的检测118

雄激素受体基因的检测120

精子线粒体DNA 4977 bp的检测123

Kallmann综合征相关基因KAL-1的检测124

第十二章 精子优化技术127

上游法127

迁移沉淀法131

密度梯度离心法132

玻璃纤维过滤法134

一、微量Percoll梯度离心法137

体外授精中的精液处理137

二、二层微量Percoll梯度离心法（用于ICSI）138

三、Isolate二层梯度离心法138

第十三章 精子分离技术140

蛋白柱分离法140

密度梯度离心法141

流式细胞仪分选法143

电泳法144

葡聚糖G50滤过法146

一、冷冻方法147

第十四章 精液、附睾精子、睾丸曲细精管的冷冻与解冻精液的冷冻与解冻147

二、冷冻精液的复温及复温后的处理149

附睾精子的冷冻与解冻150

一、附睾精子的获取、处理及冷冻150

二、附睾精子的解冻150

睾丸曲细精管的冷冻与解冻151

一、曲细精管的获取与冷冻151

二、曲细精管解冻与精子处理152

下丘脑-垂体-睾丸内分泌功能检测155

一、克罗米酚试验155

第十五章 内分泌检查155

二、LHRH兴奋试验156

三、hCG试验157

四、抑制素（inhibin）B的测定158

第十六章 影响生育的常见生殖道感染病原体检测淋球菌161

一、标本采集161

二、检测方法161

三、临床意义162

沙眼衣原体163

一、标本采集163

二、检测方法163

一、标本采集167

三、临床意义167

解脲支原体167

二、检测方法168

三、临床意义169

人免疫缺陷病毒169

一、标本采集169

二、检测方法169

人巨细胞病毒170

一、标本采集170

二、检测方法171

三、临床意义173

第十七章 睾丸（细胞）组织病理分析175

睾丸活细胞检查175

睾丸活组织检查176

睾丸组织病理分析177

第十八章 无精子症的外科诊断180

经皮附睾精子抽吸法180

睾丸细针抽吸法182

显微外科附睾精子抽吸术183

显微切割184

透射电镜精子标本处理与制作185

第十九章 精子电镜检测185

精子头部异常187

精子尾部异常188

第二十章 人类生殖细胞体外培养技术189

人卵母细胞体外培养189

人睾丸生精细胞体外培养194

一、精液采集与处理198

二、卵子处理198

三、授精方法198

IVF实验技术198

第二十一章 体外授精与胚胎培养198

ICSI实验技术199

一、精液处理199

二、卵子处理201

三、单精子显微注射（ICSI）202

四、胚胎培养和质量评判204

参考文献206

附录一 宫颈黏液评分和性交后试验的记录表格211

附录二 男性不育实验诊断流程图212

附录三 男科实验室配置213