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第一部分 生物化学实验的基本要求1

一、实验的准确性1

二、实验记录及报告2

三、实验样品的制备3

四、实验室规则3

五、实验室安全及防护知识4

六、常用仪器使用方法6

第二部分 生物化学基本实验技术13

第一节 分光光度技术13

一、基本原理13

二、测量方法13

三、仪器介绍14

实验一3，5-二硝基水杨酸（DNS）法测定还原糖19

实验二 双缩脲法测定蛋白质浓度21

实验三Folin-酚试剂法测定蛋白质浓度23

实验四 考马斯亮蓝染色法测定蛋白质浓度25

实验五 紫外分光光度法测定蛋白质浓度27

第二节 层析技术28

一、基本原理28

二、操作方法31

实验一 凝胶层析测定蛋白质的相对分子质量34

实验二 氨基酸的分离鉴定——纸层析36

实验三 离子交换层析分离混合氨基酸38

实验四 糖的薄层层析40

第三节 电泳技术42

一、基本原理42

二、几种常见的电泳方法44

实验一 血清蛋白的醋酸纤维薄膜电泳49

实验二 血清脂蛋白琼脂糖凝胶电泳52

实验三SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳测定蛋白质的相对分子质量54

实验四 等电聚焦电泳测定蛋白质等电点57

第四节 离心技术60

一、基本原理60

二、离心机的主要构造和类型62

三、制备性超速离心的分离方法63

四、离心操作的注意事项65

实验一 离心机的使用67

实验二 植物基因组DNA的提取68

第三部分 生物化学实验70

实验一 柑橘皮果胶的提取及果冻的制备70

实验二 糖的颜色反应72

实验三 酸价的测定74

实验四 碘值的测定76

实验五 皂化价的测定78

实验六 粗脂肪含量的测定——索氏抽提法79

实验七 蛋白质及氨基酸的呈色反应81

实验八 蛋白质的等电点测定和沉淀反应88

实验九总氮量的测定——凯氏（Kjeldahl）定氮法92

实验十 从牛奶中提取酪蛋白97

实验十一 血糖浓度的测定99

实验十二 酵母RNA的分离及组分鉴定102

实验十三 地衣酚显色法测定RNA含量104

实验十四 质粒DNA的提取、酶切与鉴定106

实验十五 二苯胺显色法测定DNA含量110

实验十六 菜花（花椰菜）中核酸的分离112

实验十七 核酸浓度测定——紫外线（UV）吸收法113

实验十八 酶的特性114

实验十九 根据底物浓度和酶反应速度之间的关系求米氏常数Km118

实验二十 尿液淀粉酶活力测定（Winslow法）122

实验二十一 血清谷丙转氨酶（ALT）活性测定（改良Mohun法）123

实验二十二 过氧化物酶的作用126

实验二十三 脯氨酸含量的测定127

实验二十四 大蒜细胞SOD的提取与分离129

实验二十五 维生素C含量测定131

实验二十六 甲醛滴定法测定氨基氮135

实验二十七 卵磷脂的提取与鉴定137

实验二十八 脂肪酸的β-氧化139

实验二十九 肌糖原的酵解作用141

实验三十PCR扩增目的基因144

第四部分 附录149

附录一 试剂的分级、保存与配制149

附录二 常用蛋白质等电点参考值152

附录三 常用缓冲液的配制方法153

附录四 硫酸铵饱和度的常用表158

附录五 氨基酸的一些理化常数160

附录六 常用酸碱和固态化合物的一些数据162

主要参考文献163