图书介绍

基因操作技术2025|PDF|Epub|mobi|kindle电子书版本百度云盘下载

汪峻主编著
出版社：武汉：华中师范大学出版社
ISBN：9787562243113
出版时间：2010
标注页数：184页
文件大小：27MB
文件页数：194页
主题词：基因－遗传工程

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图书目录

项目1 基因与基因组1

任务1.1 核酸的结构与功能1

1.1.1 核酸的化学结构1

1.1.2 DNA的结构与功能3

1.1.3 RNA的结构与功能5

1.1.4 核酸的理化性质6

任务1.2 基因与基因组8

1.2.1 基因概念的发展8

1.2.2 基因的结构特征10

1.2.3 染色体12

1.2.4 基因组14

任务1.3 遗传信息的传递17

1.3.1 复制17

1.3.2 转录20

1.3.3 翻译22

任务1.4 基因表达调控原理24

1.4.1 原核生物基因表达调控机制25

1.4.2 真核生物基因表达调控机制26

项目小结28

复习思考题29

项目2 基因操作的基本过程30

任务2.1 基因操作的基本概念30

任务2.2 基因操作的基本过程33

项目小结37

复习思考题37

项目3 核酸的分离纯化技术38

任务3.1 基因组DNA的分离纯化38

3.1.1 植物组织基因组DNA的提取38

3.1.2 动物组织及血液中基因组DNA的提取41

3.1.3 线粒体DNA的提取：碱变性法提取线粒体DNA43

3.1.4 细菌基因组DNA的制备：SDS法提取细菌总DNA44

3.1.5 病毒DNA的制备45

3.1.6 质粒DNA的分离纯化47

实训1 碱裂解法制备小量细菌质粒DNA49

任务3.2 RNA的分离纯化50

3.2.1 总RNA的分离纯化50

3.2.2 mRNA的分离纯化：oligo（dT）纤维素柱法56

任务3.3 核酸的检测与保存59

3.3.1 紫外分光光度法59

实训2 紫外分光光度法测定核酸含量60

3.3.2 凝胶电泳法61

实训3 琼脂糖凝胶电泳检测DNA65

3.3.3 核酸的保存66

项目小结67

复习思考题68

项目4 目的基因克隆技术69

任务4.1 目的基因的扩增69

4.1.1 PCR基本原理69

4.1.2 PCR反应体系与编程71

4.1.3 引物设计77

4.1.4 常用PCR技术类型79

实训4 PCR扩增目的基因87

任务4.2 载体及其改造88

4.2.1 常用载体88

4.2.2 常用工具酶99

实训5 质粒DNA的酶切105

实训6 琼脂糖凝胶中回收DNA片段106

项目小结110

复习思考题110

项目5 DNA体外重组技术111

任务5.1 重组DNA的构建112

5.1.1 相同黏性末端的连接113

5.1.2 平末端的连接116

5.1.3 不同黏性末端的连接117

5.1.4 人工黏性末端的连接118

5.1.5 人工接头法连接120

5.1.6 T/A克隆连接121

5.1.7 重组DNA构建应注意的事项121

实训7 DNA片段连接123

任务5.2 重组DNA的转化124

5.2.1 重组质粒转化大肠杆菌124

5.2.2 重组DNA转染真核细胞127

实训8 大肠杆菌感受态细胞的制备129

实训9 重组质粒的转化130

任务5.3 重组子的筛选与鉴定131

5.3.1 遗传学检测法131

5.3.2 物理检测法134

5.3.3 核酸分子杂交检测法135

5.3.4 免疫学检测法136

5.3.5 核酸序列分析法137

实训10 转化子筛选与鉴定139

项目小结140

复习思考题140

项目6 目的基因的表达与鉴定141

任务6.1 目的基因的表达141

6.1.1 目的基因在原核系统中的表达141

6.1.2 目的基因在真核系统中的表达148

实训11 目的基因在大肠杆菌中的诱导表达150

任务6.2 目的蛋白的鉴定151

6.2.1 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳151

6.2.2 Western杂交155

6.2.3 等电聚焦电泳159

6.2.4 双向电泳162

实训12 SDS-PAGE检测表达蛋白质164

项目小结166

复习思考题166

项目7 生物信息技术167

任务7.1 生物信息学概念167

任务7.2 生物信息数据库167

7.2.1 基因和基因组数据库168

7.2.2 蛋白质数据库168

任务7.3 数据的查询与提交170

7.3.1 数据查询170

7.3.2 向Genbank提交序列数据172

7.3.3 序列文件格式172

任务7.4 序列比对与数据库搜索173

7.4.1 序列两两比对174

7.4.2 多序列比对175

7.4.3 数据库搜索175

项目小结179

复习思考题179

附录180

参考文献183