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第一部分 DNA分析1

第一章 从组织或培养细胞同时分离DNA与RNA3

第二章 DNA的限制性内切酶消化9

第三章 琼脂糖凝胶电泳12

第四章 琼脂糖凝胶电泳的印迹转移16

第五章 应用随机引物的32p标记DNA探针的制备19

第六章 Southern印迹的杂交和竞争性杂交22

第七章 Southern杂交中地高辛修饰的核苷酸标记DNA探针的应用28

第八章 荧光素标记核酸探针的制备及其碱性磷酸酯酶催化的二氧杂环烷化学发光反应检测36

第九章 监测核酸探针中荧光素标记水平的快速检测44

第十章 辣根过氧化物酶标记的核酸探针制备及其强化的化学发光反应检测46

第十一章 寡核苷酸3'端的荧光素-11-dUTP标记及其强化的化学发光反应检测52

第十二章 RNA探针的制备57

第十三章 非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳64

第十四章 核酸的银染检测67

第十五章 DNA片段的末端标记72

第二部分 RNA分析77

第十六章 Northern印迹分析79

第十七章 RNA狭缝印迹分析91

第十八章 RNase保护测定法93

第十九章 mRNA的引物延伸分析98

第二十章 应用单链DNA探针的S1定位法105

第二十一章 细胞及组织的非放射性原位杂交111

第三部分 基因克隆技术123

第二十二章 DNA的体外包装125

第二十三章 应用人置换型载体构建哺乳动物基因组文库129

第二十四章 用于构建文库的双链cDNA制备140

第二十五章 cDNA文库的构建146

第二十六章 入文库的筛选155

第四部分 亚克隆方法163

第二十七章 亚克隆的策略与方法165

第二十八章 应用玻璃珠从琼脂糖凝胶中纯化DNA片段176

第二十九章 大肠杆菌的转化179

第三十章 细菌的电击穿孔转化184

第三十一章 应用碱裂解法制备质粒DNA190

第三十二章 应用快速煮沸法制备小量质粒DNA196

第三十三章 应用硅藻土制备质粒DNA198

第五部分 PCR技术201

第三十四章 聚合酶链式反应:基本方法203

第三十五章 反向聚合酶链式反应216

第三十六章 应用以简并寡核苷酸为引物的PCR技术克隆基因家族成员223

第三十七章 应用T-载体克隆PCR产物230

第三十八章 PCR产物的直接放射性标记239

第三十九章 应用PCR技术快速筛选含克隆片段的菌落242

第四十章 应用PCR技术筛选噬菌体文库245

第六部分 DNA序列测定249

第四十一章 应用M13噬菌体作为载体克隆DNA片段251

第四十二章 应用外切核酸酶Ⅲ制备有序缺失系列256

第四十三章 M13噬菌体生长和单链DNA制备263

第四十四章 从噬粒载体制备ssDNA266

第四十五章 用于双脱氧测序的快速质粒纯化法269

第四十六章 应用测序酶Version2.0T7 DNA聚合酶进行DNA测序273

第四十七章 线性和梯度缓冲液测序胶的灌注284

第四十八章 测序反应样品的电泳287

第四十九章 PCR产物的直接测序293

第五十章 应用热循环-双脱氧法进行DNA测序300

第五十一章 自动DNA测序仪的使用308

第五十二章 用于Maxam-Gilbert DNA测序法中的DNA末端标记319

第五十三章 DNA的化学测序323

第七部分 定点诱变与蛋白质合成327

第五十四章 双链质粒的定点诱变、结构城置换以及标记获救329

第五十五章 应用含尿嘧啶的噬粒为模板的定点诱变法339

第五十六章 无细胞系统中的mRNA翻译——兔网织红细胞裂解液344

第五十七章 无细胞系统中的mRNA翻译——麦胚提取物350

第五十八章 应用6×His标签和Ni-NTA树脂对重组蛋白进行一步纯化354