图书介绍

聚合酶链式反应（PCR）快速检测腐烂苹果中的扩展青霉2025|PDF|Epub|mobi|kindle电子书版本百度云盘下载

何鸿举，梁新红，何承云著著
出版社：北京：中国轻工业出版社
ISBN：9787518419012
出版时间：2018
标注页数：114页
文件大小：28MB
文件页数：125页
主题词：聚合酶链式反应－应用－苹果－腐烂病

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图书目录

第一章苹果汁中的扩展青霉污染及PCR技术研究现状1

第一节我国苹果及其加工生产状况2

一、苹果特性及其营养价值2

二、我国苹果的生产现状与发展前景3

三、我国苹果加工面临的竞争与挑战4

第二节棒曲霉毒素6

一、理化性质与危害6

二、分析方法8

第三节扩展青霉9

一、概述9

二、检测方法11

第四节 PCR技术应用概述12

一、PCR技术的原理12

二、PCR检测技术的发展15

三、PCR技术在微生物检测领域的应用17

第五节真菌DNA提取21

第六节克隆测序22

一、感受态细胞的制备22

二、蓝白筛选的原理23

三、电泳的原理24

第七节本研究的目的、意义、内容及技术路线24

一、研究目的及意义24

二、研究内容25

三、研究的技术路线25

第二章扩展青霉基因组DNA的提取26

第一节材料与方法27

一、试验菌株与培养基27

二、主要试剂27

三、主要仪器27

四、菌体培养与收集28

五、DNA提取方法28

六、DNA检测方法30

七、PCR扩增方法31

八、凝胶电泳检测方法31

第二节结果与分析31

一、培养方式的选择31

二、五种提取扩展青霉基因组DNA方法的比较32

三、五种提取方法所提DNA结果的比较33

四、电泳检测所提DNA的结果34

五、PCR扩增结果34

第三节结论与讨论35

第三章腐烂苹果中的真菌分离与鉴定37

第一节材料与方法37

一、材料与试剂37

二、仪器与设备37

三、方法与步骤38

第二节结果与分析38

一、棒曲霉素产生菌的主要种类38

二、不同产地腐烂苹果中棒曲霉素产生菌的差异43

第三节结论与讨论44

第四章基于氯化苄法提取DNA的PCR检测扩展青霉方法优化45

第一节材料与仪器45

一、主要原材料45

二、主要试剂46

三、主要仪器设备46

第二节方法与步骤46

一、引物选择46

二、退火温度的优化47

三、引物浓度的选择47

四、模板浓度的选择47

第三节结果与分析48

一、引物的选择48

二、退火温度48

三、引物浓度优化结果49

四、模板浓度50

五、特异性50

六、灵敏性检测结果51

第四节结论与讨论52

第五章 PCR扩增产物的克隆测序53

第一节材料与仪器53

一、主要试剂53

二、主要仪器设备54

第二节方法与步骤54

一、感受态细胞的制备54

二、PCR扩增产物回收纯化55

三、克隆质粒的构建55

四、转化感受态细胞55

五、质粒DNA制备56

六、质粒的双酶切鉴定57

七、测序57

第三节结果与分析57

一、转化结果57

二、阳性克隆鉴定结果58

三、测序与BLAST结果58

第四节结论与讨论60

第六章扩展青霉3.3703基因组DNA快速提取61

第一节材料与方法61

一、材料与试剂61

二、仪器与设备62

三、方法与步骤63

四、提取DNA的纯度及浓度检测65

五、PCR扩增65

六、凝胶电泳检测65

第二节结果与分析66

一、四种方法提取DNA纯度及浓度检测结果66

二、四种方法提取总DNA样品检测结果67

三、PCR扩增检测结果67

第三节结论与讨论68

第七章 PCR特异性扩增扩展青霉3.3703和扩展青霉3.542569

第一节材料与方法69

一、材料与试剂69

二、仪器与设备71

三、方法与步骤72

第二节结果与分析75

一、PCR扩增引物筛选结果75

二、PCR引物特异性试验结果76

三、PCR敏感性试验结果77

第三节结论与讨论78

第八章扩展青霉3.5425实时PCR快速检测条件优化79

第一节材料与方法79

一、材料与试剂79

二、仪器与设备79

三、方法与步骤80

第二节结果与分析81

一、退火温度对扩展青霉3.5425实时PCR结果的影响81

二、引物浓度对扩展青霉3.5425实时PCR检测的影响81

三、实时PCR灵敏度检验81

第三节结论与讨论91

第九章 PCR快速检测不同来源扩展青霉的条件优化92

第一节材料与方法92

一、材料与试剂92

二、主要仪器与设备93

三、方法与步骤94

第二节结果与分析97

一、PCR退火温度优化结果97

二、最适引物浓度的筛选97

三、最适模板浓度的筛选98

四、最适底物浓度的选择99

五、优化参数条件下的PCR检测99

六、人工感染样品的PCR检测100

第三节结论与讨论100

参考文献102