生物化学技术原理及应用2025|PDF|Epub|mobi|kindle电子书版本百度云盘下载

生物化学技术原理及应用PDF格式电子书版下载

注意：本站所有压缩包均有解压码： 点击下载压缩包解压工具

第一编 概述3

第一章 生命大分子物质的制备3

第一节 材料的选择与处理3

一、材料的选择3

二、材料的处理4

第二节 确立测定方法5

一、目的与要求5

二、常用的测定方法5

第三节 细胞的破碎8

一、机械破碎9

二、溶胀和自溶9

三、化学处理10

四、生物酶降解10

第四节 抽提10

一、抽提的含义10

二、抽提有效成分的影响因子10

第五节 浓缩13

一、沉淀法14

二、吸附法14

三、超过滤法14

四、透析法14

五、减压蒸馏法15

六、冰冻干燥法15

第六节 纯化方案的设计与评价15

一、纯化方案的设计15

二、纯化方案的评价17

第七节 有效成分纯度和性质的分析18

第八节 应用实例18

思考题与参考文献19

第二编 纯化方法23

第二章 沉淀法23

第一节 基本原理与沉淀类型23

一、基本原理23

二、制备蛋白质23

三、制备核酸33

第二节 应用实例36

一、脾磷酸二酯酶的纯化36

二、细菌染色体DNA的制备36

思考题与参考文献37

第三章 吸附层析39

第一节 吸附柱层析40

一、常用术语40

二、基本原理41

三、吸附剂42

四、洗脱剂45

五、层析柱的制备与层析操作45

六、应用与实例48

第二节 薄层层析51

一、操作及注意事项52

二、应用实例58

第三节 聚酰胺簿膜层析59

一、基本原理59

二、应用实例59

思考题与参考文献63

第四章 疏水层析64

第一节 基本原理64

第二节 操作与应用65

一、层析柱的制备65

二、加样与洗脱66

三、应用实例66

思考题与参考文献69

第五章 离子交换层析70

第一节 基本原理70

第二节 离子交换剂的分类及性质72

一、分类72

二、性质80

第三节 离子交换剂与缓冲液的选择88

一、离子交换剂的选择88

二、缓冲液的选择89

三、加样量的确定92

第四节 操作92

一、离子交换剂的处理、再生和转型92

二、分离物质的交换93

三、物质的洗脱与收集94

第五节 应用96

一、制备、纯化生命物质96

二、测定蛋白质的等电点99

思考题与参考文献100

第六章 凝胶过滤101

第一节 凝胶的分类及性质101

一、葡聚糖凝胶102

二、琼脂糖凝胶104

三、聚丙烯酰胺凝胶106

四、Sephacryl106

五、Superdex108

第二节 基本原理109

第三节 操作111

一、凝胶的选择和处理111

二、凝胶柱的制备112

三、加样与洗脱113

四、凝胶柱的再生及保存117

第四节 应用118

一、脱盐和浓缩118

二、分离生命物质118

三、去热源物质120

四、测定分子质量120

五、其他123

思考题与参考文献123

第七章 亲和层析124

第一节 基本原理124

第二节 操作126

一、基质的选择126

二、配体的选择127

三、亲和吸附剂的制备129

四、特异性吸附131

五、分离大分子物质132

六、亲和层析柱的再生134

第三节 提高吸附剂的操作容量134

一、在配体和基质之间引入“手臂”134

二、增加配体取代的程度135

三、配体与基质以最少的键连接137

四、基质多孔性的影响137

五、其他137

第四节 应用实例138

一、纯化大分子物质138

二、研究酶的结构与功能141

三、实例142

思考题与参考文献145

第八章 聚焦层析146

第一节 基本原理146

一、多缓冲剂和多缓冲交换剂146

二、聚焦层析原理147

第二节 操作150

一、多缓冲剂的选择150

二、多缓冲交换剂用量的确定150

三、多缓冲交换剂的处理151

四、样品的准备152

五、上样和洗脱152

六、样品中多缓冲剂的去除153

第三节 应用153

一、分离模型蛋白质153

二、分离复杂的物质154

三、鉴定某些酶的性质154

思考题与参考文献156

第九章 高效液相色谱157

第一节 基本原理158

第二节 反相高效液相色谱161

一、固定相、流动相和色谱柱162

二、分离纯化糖基化白蛋白肽片段164

第三节 应用166

一、定性和定量分析166

二、测定酶活性167

三、测定蛋白质分子质量167

四、分离核酸和蛋白质168

思考题与参考文献174

第十章 固定化的酶与微生物175

第一节 制备方法176

一、固定化酶176

二、固定化微生物179

第二节 制品的性质180

一、酶的相对活力180

二、活力曲线与最适pH值181

三、稳定性182

四、米氏常数183

五、其他184

第三节 应用184

一、工业方面184

二、医学方面185

三、生化分析方面186

四、应用实例188

思考题与参考文献190

第三编 鉴定方法193

第十一章 标记193

第一节 核酸标记193

一、标记物的制备及类型193

二、非核素标记194

三、核素标记208

四、标记物纯化211

五、探针的鉴定213

六、应用实例216

第二节 蛋白质（酶、抗体）标记220

一、标记方法220

二、核素和非核素标记226

思考题与参考文献234

第十二章 重组DNA235

第一节 重组DNA的部件236

一、工具酶236

二、载体238

三、目的基因241

第二节 重组247

一、黏性末端连接法247

二、平端连接法249

三、平黏连接法249

四、T-A连接法249

五、同聚物加尾连接法249

六、人工接头连接法250

第三节 DNA扩增252

一、重组DNA导入宿主细胞252

二、重组体的筛选与鉴定254

三、表达产物的纯化256

第四节 应用实例257

一、分离总RNA和mRNA257

二、反转录合成第一链cDNA257

三、PCR扩增及其产物纯化257

四、PCR产物的克隆258

五、重组质粒的提取及限制性内切核酸酶分析258

思考题与参考文献260

第十三章 DNA序列测定260

第一节 双脱氧链终止法260

一、基本原理260

二、载体系统262

三、测序试剂265

四、测序操作268

五、变性电泳271

六、序列读取271

第二节 PCR法273

一、直接测序273

二、循环测序274

第三节 化学降解法275

一、测序原理276

二、一般程序277

三、具体操作277

四、应用实例280

思考题与参考文献281

第十四章 生物芯片282

第一节 基因芯片282

一、基本原理和工作流程282

二、制备及操作285

三、应用实例291

第二节 蛋白质芯片296

一、原理及特点297

二、制备与操作297

三、应用实例299

第三节 芯片实验室303

一、芯片实验室的特点303

二、应用实例304

思考题与参考文献307

第十五章 聚合酶链反应308

第一节 基本原理308

一、反应系统308

二、反应过程及条件313

第二节 PCR的类型315

一、普通PCR315

二、原位PCR316

三、反转录PCR316

四、反向PCR317

五、不对称PCR318

六、巢式PCR318

七、彩色PCR319

第三节 应用320

一、构建cDNA文库320

二、直接测序320

三、标记DNA探针320

四、寻找新基因320

五、检测环境中的致病菌与指示菌321

思考题与参考文献321

第十六章 细胞凋亡322

第一节 基本原理与主要特性322

一、基本原理322

二、主要特性334

第二节 检测细胞凋亡的方法337

一、形态学337

二、DNA片段339

三、酶活性与组蛋白340

四、流式细胞仪342

第三节 应用344

一、抗肿瘤药物的研究和开发344

二、疾病的诊断和治疗344

思考题与参考文献346

第十七章 生物传感器347

第一节 基本原理347

一、离子选择电极348

二、生物活性材料349

第二节 类型与制备350

一、类型350

二、制备350

第三节 应用351

一、工业方面351

二、医学方面352

三、环境监测方面353

思考题与参考文献353

第十八章 电泳355

第一节 基本原理356

第二节 聚丙烯酰胺凝胶电泳358

一、基本原理359

二、一般操作364

第三节 琼脂糖凝胶和半干式聚丙烯酰胺凝胶电泳383

一、琼脂糖凝胶电泳384

二、半干式聚丙烯酰胺凝胶电泳（分离DNA）387

第四节 变性聚丙烯酰胺凝胶电泳388

一、SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳389

二、尿素-聚丙烯酰胺凝胶电泳390

三、SDS-尿素-聚丙烯酰胺凝胶电泳391

第五节 聚丙烯酰胺凝胶电聚焦392

一、基本原理393

二、载体两性电解质的理化性质393

三、载体两性电解质的pH范围与用量选择394

四、测定蛋白质等电点的操作395

第六节 毛细管电泳399

一、基本原理与类型399

二、电泳装置402

三、应用实例405

第七节 印迹法（转移电泳）407

一、基本原理408

二、操作及注意事项409

三、应用411

思考题与参考文献413

第十九章 免疫分析414

第一节 抗体的性质、制备及纯化414

一、抗体的性质414

二、多克隆抗体的制备415

三、单克隆抗体的制备421

四、抗体的检测425

五、抗体的纯化428

第二节 抗原抗体反应430

一、凝集反应430

二、免疫扩散434

三、免疫电泳436

四、固相免疫吸附（含ELISA）441

五、免疫微球测定449

思考题与参考文献454

第二十章 气相色谱456

第一节 基本原理457

一、常用术语457

二、原理458

第二节 气相色谱仪的构造460

一、载气流速的控制和测量460

二、进样系统461

三、恒温室461

四、色谱柱461

五、检定器465

第三节 操作466

一、操作要点466

二、条件的选择467

第四节 定性和定量检测467

一、定性检测467

二、定量检测468

第五节 应用472

一、分析蛋白质和氨基酸472

二、分析核酸472

三、分析糖类物质472

四、分析脂肪酸473

五、分析农药474

思考题与参考文献474

参考文献475

附录484

一、常用数据484

二、常用缓冲液的配制494

缩写词索引499