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1 概述4

2 酶学分析的一般特性4

2.1 酶学实验的基本要求4

2.2 酶学测定必须遵循什么？6

2.2.1 反应级数6

2.2.2 酶学反应级数的重要性8

2.2.3 酶反应速率的测定10

2.2.4 米氏方程22

2.2.5 酶的抑制25

2.2.6 多底物反应30

2.2.7 酶学实验的必要条件32

2.3 仪器方面45

2.3.1 光谱方法45

2.3.2 电化学方法62

2.3.3 放射性标记法65

2.3.4 其他方法65

2.4 偶联酶反应理论66

2.4.1 双偶联酶反应66

2.4.2 三偶联反应69

2.5 底物测定69

2.5.1 终点法70

2.5.2 偶联酶反应的底物测定71

2.5.3 动力学方法测定底物71

2.5.4 酶的循环72

3 酶学检测实验75

3.1 酶的命名75

3.2 酶实验操作中的注意事项77

3.3 特殊酶实验80

3.3.1 氧化还原酶，EC 180

3.3.2 转移酶，EC 2116

3.3.3 水解酶，EC 3130

3.3.4 裂解酶，EC 4166

3.3.5 异构酶，EC 5173

3.3.6 连接酶类（合成酶），EC 6177

3.3.7 多酶复合体的检测180

3.3.8 底物测定185

3.4 酶性质的测定188

3.4.1 蛋白质定量188

3.4.2 磷酸测定199

3.4.3 糖蛋白测定200

3.4.4 蛋白质与二甲基辛二硝酸二盐酸酯交联201

3.4.5 酶溶液浓缩202

3.5 酶免疫测定207

3.5.1 放射性免疫测定207

3.5.2 非竞争固相酶免疫测定208

3.5.3 竞争固相酶免疫测定208

3.5.4 酶免疫测定方法及固定化技术210

4 结合测定215

4.1 不同类型的结合215

4.1.1 总论215

4.1.2 如何识别专一可逆性结合？216

4.1.3 实验方面217

4.2 利用大小差异的结合测定219

4.2.1 平衡透析220

4.2.2 结合实验评估224

4.2.3 超滤225

4.2.4 凝胶过滤225

4.2.5 超速离心226

4.3 光谱法227

4.3.1 示差分光法228

4.3.2 荧光分光法233

4.4 其他结合测定法237

4.4.1 放射性标记法237

4.4.2 表面等离子共振法237

5 酶的技术应用239

5.1 酶的固定化模式239

5.1.1 吸附法240

5.1.2 包埋法241

5.1.3 微囊法241

5.1.4 交联法242

5.1.5 固相载体共价固定法243

5.2 酶的固定化实验245

5.2.1 尼龙珠微量包埋245

5.2.2 聚丙烯酰胺包埋246

5.2.3 玻璃表面共价固定化247

5.2.4 可控孔洞玻璃表面共价固定化249

5.2.5 聚酰胺共价固定化251

5.2.6 聚酯固定化255

5.2.7 对苯甲磺酰氯辅助的碱性水解、活化与固定化257

5.2.8 羰基二咪唑参与的碱解、活化与固定化258

5.3 固定化酶的分析259

5.3.1 通则259

5.3.2 固定化酶的连续光度测定260

5.3.3 与固定化酶反应的辅助因子261

5.4 酶反应器262

5.4.1 批式反应器（搅拌罐式反应器）263

5.4.2 膜反应器263

5.4.3 固定床反应器263

5.4.4 固定化细胞264

5.5 生物传感器264

5.5.1 酶电极264

5.5.2 免疫电极267

5.5.3 其他生物传感器267

5.6 固定化酶用于治疗268