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第一章 生物化学实验的基本要求1

第一节 实验的准确性1

一、系统误差1

二、偶然误差2

三、过失错误2

第二节 实验记录及报告2

一、实验记录3

二、实验报告3

第三节 实验样品的制备4

一、动物的脏器4

二、微生物4

三、细胞5

第二章 常见的实验方法及基本原理6

第一节 透析6

第二节 沉淀7

一、蛋白质的特性7

二、常用的蛋白质沉淀方法8

第三节 层析11

一、层析原理11

二、几种常见的层析法11

第四节 电泳20

一、电泳法的基本原理20

二、几种常用电泳法简介22

第五节 分光光度法25

一、基本原理25

二、比色法26

三、分光光度法27

四、浊度法28

第六节 离心28

第七节 常用的蛋白质现代分析法30

一、荧光分光光度法30

二、旋光色散与圆二色性法36

三、核磁共振波谱法40

第三章 普通实验48

实验一 实验的基本操作及要求48

实验二 糖的颜色反应52

实验三 3,5-二硝基水杨酸（DNS）法测定还原糖54

实验四 淀粉酶对壳聚糖降解过程的测定57

实验五 血清胆固醇测定（磷硫铁法）59

实验六 植物叶片在衰老过程中过氧化脂质含量的变化60

实验七 铜离子氧化法测定维生素C含量（紫外法）62

实验八 氨基酸的分离鉴定——纸层析法63

实验九 DNS-Cl法测定蛋白质N-末端的氨基酸65

实验十 离子交换柱层析法分离氨基酸67

实验十一 蛋白质性质（一）——蛋白质及氨基酸的呈色反应69

实验十二 蛋白质性质（二）——蛋白质的等电点测定和沉淀反应75

实验十三 蛋白质的制备——牛奶中提取酪蛋白80

实验十四 Folin-酚法测定血清白蛋白含量81

实验十五 Bradford法测定蛋白质含量83

实验十六 紫外分光光度法测定蛋白质的含量84

实验十七 血清蛋白的醋酸纤维薄膜电泳85

实验十八 猪脾脏DNA提取与二苯胺定量法88

实验十九 酵母RNA提取与地衣酚显色测定法91

实验二十 菜花（花椰菜）中核酸的分离与鉴定93

实验二十一 酶的特性96

实验二十二 多酚氧化酶的制备和化学性质及影响多酚氧化酶作用的各种因素100

实验二十三 枯草杆菌蛋白酶的活力测定104

实验二十四 根据底物浓度和酶反应速率之间的关系求米氏常数Km107

实验二十五 DNA京脂糖凝胶电泳110

实验二十六 质粒DNA的小量制备112

第四章 综合实验115

实验一 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳及蛋白印迹115

实验二 PCR扩增目标基因片段120

实验三 DNA的酶切及连接技术122

实验四 重组DNA质粒的转化技术125

实验五 枯草杆菌碱性磷酸酶的制备及酶活力的测定127

实验六 鸡卵类黏蛋白的制备及活力的测定130

实验七 同步荧光法测定蛋白质含量135

附录138

学生实验室守则138

一、常用仪器的使用139

二、缓冲溶液147

三、常用的硫酸铵饱和度计算表150

四、层析法常用数据及性质表152

五、分子生物学及基因工程常用数据156

六、一些常用单位164

七、常用洗液的配制方法165

八、元素的原子量表166

参考文献167