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第一节 流式细胞术基本原理简介1

一、概念1

二、流式细胞术的工作原理1

三、流式细胞术的特点4

四、流式细胞术可测量的参数4

五、影响流式细胞术定量分析的因素5

六、狭缝扫描流式细胞计6

第二节 流式细胞术的样品制备技术概论8

一、酶学法9

二、化学法10

三、物理法10

第三节 新鲜实体瘤组织单细胞悬液的制备11

一、酶消化法12

二、机械法13

三、化学法15

四、低渗组织液处理法17

第四节 石蜡包埋组织单细胞悬液的制备19

第五节 脱落细胞样品单细胞悬液的制备24

第六节 血液单细胞样品的制备27

一、淋巴细胞的制备28

二、粒细胞的制备32

三、单核细胞的制备32

四、白血病细胞的制备34

五、流式细胞术检测血中网织红细胞的样品制备34

第七节 细胞培养及单细胞悬液的制备38

一、细胞培养38

二、单细胞悬液的制备39

第八节 单细胞悬液的保存42

一、深低温保存42

二、70%乙醇或75%甲醇固定保存44

三、其他固定剂保存45

第九节 流式细胞术定量细胞学荧光染色技术46

一、定量细胞学染色原理46

二、定量荧光细胞染色技术的评价标准48

三、定量DNA荧光染色技术48

四、定量RNA荧光染色技术53

第十节 影响定量细胞学荧光染色的因素59

一、温度的影响59

二、pH的影响61

三、荧光染料浓度的影响62

四、杂质对细胞荧光染色的影响63

五、细胞固定剂对细胞荧光染色的影响64

六、其他影响因素65

第十一节 流式细胞术参考标准样品的制备67

一、使用参考标准样品的意义67

二、参考标准样品的性质68

三、参考标准样品的制备68

四、石蜡包埋肿瘤DNA倍体分析的二倍体参考标准样品的选择75

第十二节 流式细胞术免疫学样品的制备79

一、流式细胞术免疫学样品制备的基本原理和常用方法80

二、流式细胞术检测造血系统恶性肿瘤细胞表面标记抗原的样品制备81

三、流式细胞术检测癌基因蛋白及其它细胞内抗原的样品制备89

四、流式细胞术进行抗细胞表面抗原的单克隆抗体制备的初筛98

五、流式细胞术检测石蜡包埋组织细胞表面植物凝集素受体的样品制备100

六、流式细胞术免疫荧光染色样品制备过程中一些人工假象的分析及处理102

七、流式细胞术在其它方面的一些应用104

第十三节 流式细胞术分析染色体组型的样品制备108

第十四节 流式细胞酶学方法113

一、流式细胞酶学方法的条件114

二、用荧光底物可能测定的酶活性115

三、常见的几种酶及其相应的荧光底物配方115

四、酶活性检测的样品处理及注意事项115

第十五节 流式细胞术定量检测雌激素受体的方法117

第十六节 流式细胞术检测E-玫瑰花环实验方法121

第十七节 流式细胞术检测血液红细胞感染疟原虫的方法125

第十八节 流式细胞术鉴别死活细胞的PI荧光染色法127

第十九节 荧光显微镜技术简介130

一、基本原理130

二、荧光显微镜的基本结构132

三、荧光显微镜的使用方法135

第二十节 用荧光显微术观察FITC和PI对固定细胞的蛋白和DNA的双染色136

第二十一节 荧光显微术观察活细胞的线粒体和细胞核138

第二十二节 实验溶液的配制140

一、荧光染色液的配制140

二、酶类溶液的配制141

三、平衡盐溶液的配制143

四、磷酸缓冲液的配制144

五、细胞生长培养液的配制146

六、其它溶液的配制153

第二十三节 流式细胞仪的操作程序及注意事项156