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1绪论1

1.1阿特拉津概述1

1.1.1阿特拉津分布及使用现状1

1.1.2阿特拉津的危害2

1.1.3土壤中阿特拉津的生物修复技术4

1.2丛枝菌根真菌概述及其多样性9

1.2.1丛枝菌根真菌的结构9

1.2.2 AM真菌多样性的研究10

1.2.3 AM真菌与土壤结构10

1.3逆境胁迫下植物组学方法研究概述13

1.3.1代谢组学概述13

1.3.2转录组学概述17

1.3.3蛋白质组学概述18

1.4苜蓿概述20

参考文献20

2黑龙江省农田阿特拉津残留土壤的丛枝菌根真菌多样性研究28

2.1材料与方法28

2.1.1材料采集与处理28

2.1.2试验方法29

2.2结果与分析40

2.2.1阿特拉津残留检测40

2.2.2土壤理化性质42

2.2.3土壤酶活性42

2.2.4玉米根部侵染率44

2.2.5 AM真菌形态鉴定45

2.2.6 AM真菌多样性66

2.2.7 AM真菌孢子密度、物种丰度和土壤因子的关系69

2.2.8 AM真菌单孢扩繁结果70

2.2.9 AM真菌多样性测序结果及分析72

2.3讨论78

2.3.1 AM真菌的分离及形态学鉴定78

2.3.2 AM真菌单孢扩繁79

2.3.3土壤因子对AM真菌多样性的影响79

2.3.4阿特拉津残留量对AM真菌侵染率的影响81

2.3.5阿特拉津残留对AM真菌多样性的影响81

2.3.6 AM真菌多样性研究方法82

2.4本章小结83

参考文献83

3菌根对土壤中阿特拉津降解及土壤酶活性影响的研究86

3.1材料与方法86

3.1.1供试材料86

3.1.2试验方法86

3.2结果与分析90

3.2.1苜蓿培养结果90

3.2.2菌根侵染情况检测91

3.2.3土壤中阿特拉津测定结果92

3.2.4土壤中关键酶活性测定结果94

3.3讨论97

3.3.1苜蓿培养结果97

3.3.2菌根侵染率测定分析98

3.3.3土壤阿特拉津的提取分析99

3.3.4土壤酶活性测定分析100

3.4本章小结100

参考文献101

4丛枝菌根根际细菌群落对阿特拉津胁迫的响应102

4.1材料与方法102

4.1.1供试材料与盆栽设计102

4.1.2试验方法103

4.2结果与分析104

4.2.1土壤理化性质与AM真菌侵染104

4.2.2细菌群落构成105

4.2.3细菌群落α多样性分析106

4.2.4苜蓿接种摩西球囊霉与施加阿特拉津对细菌群落结构的影响107

4.3讨论108

4.4本章小结110

参考文献110

5阿特拉津胁迫苜蓿丛枝菌根生理特性研究112

5.1材料与方法112

5.1.1供试材料112

5.1.2试验方法112

5.2结果与分析116

5.2.1苜蓿培养结果116

5.2.2苜蓿生长指标的测定结果117

5.2.3苜蓿光合特性分析118

5.2.4苜蓿抗逆性生理指标分析121

5.2.5苜蓿抗氧化防御指标分析125

5.3讨论132

5.3.1苜蓿培养结果及侵染情况分析132

5.3.2阿特拉津对苜蓿生长指标的影响133

5.3.3阿特拉津对苜蓿光合特性的影响133

5.3.4阿特拉津对苜蓿抗逆性生理指标的影响133

5.3.5阿特拉津对苜蓿抗氧化防御指标的影响134

5.4本章小结135

参考文献135

6阿特拉津胁迫下苜蓿菌根转录组学分析137

6.1材料与方法137

6.1.1供试材料137

6.1.2试验方法137

6.2结果与分析142

6.2.1 RNA提取结果142

6.2.2 Illumina测序流程142

6.2.3组装后功能注释结果146

6.2.4试验组与对照组差异表达分析147

6.2.5 RT-PCR检验结果151

6.3讨论152

6.3.1 RNA提取优化152

6.3.2差异基因表达分析153

6.3.3 RT-PCR检验155

6.4本章小结156

参考文献156

7阿特拉津胁迫下苜蓿菌根蛋白质组学研究157

7.1材料与方法157

7.1.1供试材料157

7.1.2试验方法157

7.2结果与分析159

7.2.1蛋白质浓度及SDS-PAGE初步检测159

7.2.2苜蓿蛋白质的鉴定160

7.2.3苜蓿蛋白的GO分析166

7.2.4苜蓿蛋白的KEGG通路分析169

7.3讨论171

7.3.1阿特拉津降解相关蛋白171

7.3.2阿特拉津胁迫应答相关蛋白173

7.3.3参与植物免疫应答相关蛋白175

7.3.4蛋白质翻译、合成及加工相关蛋白176

7.3.5信号传递和生物进程相关蛋白176

7.4本章小结178

参考文献179

8阿特拉津胁迫下苜蓿菌根代谢组学研究182

8.1材料与方法182

8.1.1供试材料182

8.1.2试验方法182

8.2结果与分析186

8.2.1苜蓿培养情况186

8.2.2不同时期土壤中阿特拉津的降解动态187

8.2.3菌根根系分泌物对阿特拉津的降解能力187

8.2.4菌根根系分泌物组分特征194

8.2.5土壤中阿特拉津中间代谢产物分析201

8.2.6苜蓿根内代谢物数据分析203

8.3讨论226

8.3.1根系分泌物对阿特拉津的降解分析226

8.3.2根系分泌物组分鉴定227

8.3.3不同处理苜蓿根际土壤中阿特拉津中间代谢产物229

8.3.4苜蓿根内代谢物差异表达分析229

8.4本章小结230

参考文献231