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第一章 绪论1

第一节 概述1

一、毛细管电泳的沿革1

二、毛细管电泳发展新动向2

第二节 电泳与色谱3

第三节 电细管电泳分离模式4

第四节 毛细管电泳的特点5

参考文献7

第二章 毛细管电泳的基本理论9

第一节 分离过程9

一、分离的一般过程9

二、数学描述10

第二节 基础概念12

一、电泳、淌度、绝对淌度与有效淌度12

二、电渗、电渗率及合淌度14

三、两相分配与权均淌度16

四、分离模式新归属17

第三节 分析窗口17

第四节 理论效率及其表示18

一、效率方程18

二、峰加宽因素19

(一)初始区带宽度19

(二)分离加宽19

(三)极限效率21

参考文献22

第三章 毛细管电泳仪器系统23

第一节 毛细管电泳仪基本结构23

第二节 进样系统24

一、基本构成24

二、进样方法25

第三节 毛细管清洗和缓冲液填灌机构27

第四节 电源及其回路28

第五节 毛细管及其温度控制28

一、检测窗口制作29

二、温度控制29

第六节 检测及其数据记录与处理系统30

一、检测30

(一)紫外吸收30

(二)激光诱导荧光31

二、数据记录与处理35

参考文献36

第四章 分离条件选择策略38

第一节 毛细管电泳模式的选定38

第二节 基本操作条件选择39

一、电泳电压39

二、电泳温度40

三、毛细管及其洗涤41

四、进样与聚焦进样42

(一)电聚焦42

(二)pH聚焦43

(三)色谱浓集44

五、检测条件44

第三节 分离介质选择46

一、毛细管区带电泳介质选择46

(一)pH及其缓冲试剂46

(二)添加剂48

(三)溶剂49

二、毛细管凝胶电泳与非胶筛分介质选择49

三、胶束电动毛细管色谱介质选择51

(一)表面活性剂选择原则51

(二)表面活性剂搜寻策略53

(三)胶束修饰及其他53

四、其他模式的介质选择54

第四节 条件选择流程55

参考文献56

第五章 毛细管制作技术58

第一节 涂层技术58

一、动态吸着方法58

二、物理涂布技术59

三、化学涂层技术60

(一)活性基团引入60

(二)引入目标涂层试剂62

四、溶胶-凝胶技术64

五、吸附-化学交联65

第二节 凝胶毛细管制备65

一、基本问题65

二、解决策略66

三、琼脂糖凝胶毛细管的制备66

四、聚丙烯酰胺凝胶毛细管的制备67

(一)基础67

(二)高压灌胶69

(三)等速电泳灌胶法70

(四)低压控温悬挂聚合灌胶法70

五、梯度聚丙烯酰胺凝胶毛细管制备72

第三节 电色谱毛细管的制备74

一、柱塞制作方法74

二、填充柱的制备75

第四节 特殊技术76

参考文献78

第六章 电渗控制80

第一节 理论控制方法80

第二节 实用控制方法81

一、添加剂法81

(一)增粘剂82

(二)阳离子82

(三)两性有机离子及中性有机物84

二、管壁涂层法85

第三节 外加电磁场控制法86

一、电场控制装置86

二、电渗的单电源四电极控制89

(一)控制原理89

(二)控制结果91

第四节 电渗电场控制的理论与结论94

第五节 电渗控制在分离中的应用97

第六节 常用电渗测定方法99

参考文献100

第七章 手性分离103

第一节 毛细管电泳手性分离原理103

一、手性分离基本策略103

二、手性消除103

三、构建手性环境104

(一)毛细管区带电泳105

(二)胶束电动色谱107

(三)毛细管凝胶电泳109

(四)毛细管电色谱110

第二节 分离条件选择110

一、基本原则110

二、选择策略111

第三节 手性毛细管电泳的应用与发展动向115

参考文献117

第八章 蛋白质分析119

第一节 基本概念119

一、蛋白质的淌度120

二、等电点121

三、吸附121

第二节 蛋白质的吸附与控制121

一、管壁情化处理122

二、样品处理122

三、缓冲液处理123

第三节 蛋白质的尺寸分离124

一、筛分介质的选择124

二、缓冲体系的选择127

三、其他条件130

第四节 蛋白质等电聚焦130

一、一步法131

二、两步法131

第五节 蛋白质的亲和毛细管电泳132

一、基本原理132

二、基本方法132

第六节 微量制备133

一、单次收集134

二、多次重复收集134

三、多次收集-单次纯化134

第七节 应用举例134

一、促红细胞生成素肽谱(指纹图)134

二、分子量测定136

三、等电点测定139

四、其他应用140

参考文献141

第九章 DNA及其碎片分析143

第一节 DNA及其片段分离基础143

一、毛细管电泳模式选择143

二、筛分介质144

三、缓冲体系145

四、样品处理、进样和检测方法147

第二节 基本应用148

一、核苷酸分析148

二、寡聚核苷酸与单链DNA(ssDNA)片段分离151

三、双链DNA(dsDNA)分离154

(一)小片段dsDNA分离与应用154

(二)大片段DNA(〉2kbp)分离159

第三节 DNA测序160

一、DNA测序战略160

二、DNA比长测序原理160

三、毛细管电泳测序基本流程163

参考文献169

第十章 糖及其缀合物分析172

第一节 概述172

一、糖的分类172

二、糖分析的问题及进展172

第二节 糖CE的基本策略--使糖带电173

一、络合带电173

二、强碱电离176

三、衍生带电176

第三节 糖的检测177

一、非衍生糖的检测177

(一)电化学检测177

(二)紫外-可见吸收检测178

(三)荧光或激光诱导荧光检测179

二、糖的衍生179

第四节 糖的电泳分离182

一、基本分离条件182

二、单糖电泳182

三、寡糖电泳184

第五节 糖缀合物的电泳分离186

一、神经节苷指的分离186

二、糖蛋白微观不均一性分析191

参考文献199

第十一章 小离子与大细胞分离201

第一节 红细胞电泳201

一、背景201

二、红细胞的特点与电动原理202

三、细血球的制备203

四、电泳操作203

五、基本结果204

六、血红细胞电泳的问题与克服方法206

七、其他颗粒物电泳207

第二节 单细胞分析207

一、单细胞进样技术208

(一)插入(打孔)取样208

(二)整细胞进样210

二、应用实例211

(一)单巨细胞5-羟色胺的释放和残留测定211

(二)单细胞氨基酸柱上衍生CE分析212

第三节 小离子电泳213

一、检测213

(一)直接检测213

(二)间接紫外检测216

二、结束语218

参考文献219

符号表223