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第一篇 生物化学与分子生物学实验基本理论与技术2

第一章 生物化学实验基本知识与操作2

第一节 生物化学实验基本知识2

第二节 生物化学实验基本操作4

第二章 分光光度技术15

第一节 分光光度技术的基本原理15

第二节 常用分光光度计的使用介绍20

第三章 生物大分子的提取、沉淀和离心分离技术27

第一节 生物材料的选取与预处理27

第二节 生物大分子的沉淀分离技术30

第三节 生物大分子离心分离技术33

第四章 电泳技术38

第一节 电泳技术的基本原理和分类38

第二节 电泳的分类39

第三节 电泳的影响因素及常见问题42

第五章 层析技术45

第一节 层析技术概述45

第二节 吸附层析45

第三节 分配层析47

第四节 离子交换层析49

第五节 凝胶层析50

第六节 亲和层析54

第七节 高效液相层析55

第六章 分子生物学基本技术56

第一节 核酸分子杂交56

第二节 聚合酶链反应59

第三节 分子克隆61

第二篇 基本实验66

实验一 双缩脲法测定蛋白质浓度66

实验二 Folin-酚试剂法（Lowry法）测定蛋白质浓度68

实验三 紫外分光光度法测定蛋白质浓度70

实验四 考马斯（Coomassie）亮蓝结合法测定蛋白质浓度72

实验五 BCA法测定蛋白质浓度74

实验六 酪蛋白的制备76

实验七 细胞核蛋白质的提取77

实验八 动物肝中提取DNA80

实验九 琼脂糖凝胶电泳检测质粒DNA82

实验十 血浆脂蛋白琼脂糖凝胶电泳85

实验十一 聚丙烯酰胺凝胶电泳分离乳酸脱氢酶同工酶88

实验十二 聚丙烯酰胺等电聚焦电泳93

实验十三 醋酸纤维素薄膜对血清蛋白的电泳97

实验十四 亲和层析纯化胰蛋白酶99

实验十五 离子交换层析分离氨基酸102

实验十六 蛋白质相对分子质量测定——凝胶过滤层析法104

实验十七 限制性内切酶消化DNA分子107

实验十八 核糖核酸（RNA）的提取109

实验十九 PCR基因扩增111

第三篇 融合实验114

实验二十 激素对血糖浓度的影响及血糖的测定114

实验二十一 碱性磷酸酶（AKP）米氏常数（Km）的测定——底物浓度对酶促反应速率的影响120

实验二十二 鸡血SOD的提取、分离及活力测定122

实验二十三 碱性磷酸酶的制备及活力测定124

实验二十四 猪心肌细胞线粒体可溶性ATP合酶的提纯128

实验二十五 血清γ-球蛋白的分离纯化与鉴定132

实验二十六 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）检测目的蛋白质136

实验二十七 氨基酸的纸上层析与氨基酸的转氨基作用140

实验二十八 Southern印迹杂交分析142

实验二十九 Northern印迹杂交分析145

实验三十 RT-PCR扩增目的基因cDNA147

实验三十一 琼脂糖凝胶中DNA片段的回收149

实验三十二 质粒DNA的提取、酶切及鉴定151

实验三十三 质粒载体和外源DNA的连接反应155

实验三十四 大肠杆菌感受态细胞的制备及转化157

实验三十五 克隆的筛选和快速鉴定159

第四篇 创新实验162

实验三十六 天然药物分离、纯化及诱导肿瘤细胞凋亡的研究162

实验三十七 肿瘤化疗激活自噬的分子检测164

实验三十八 特定细胞基因敲除小鼠的获得与鉴定166

实验三十九 基于荧光素酶报告基因HeLa细胞体系的建立及其在评价食品雌激素及雌激素样物质含量中的应用168

实验四十 泰山特色性中草药抗病毒治疗的活性研究170

实验四十一 STAT4基因单核苷酸多态性与中国汉族人群系统性红斑狼疮关系的研究172

实验四十二 泰山药用植物中镰刀菌毒素降解菌的筛选及其复合酶制剂的制备174

实验四十三 鸭跖草中1-脱氧野尻霉素的来源及其降血糖作用研究176

实验四十四 类似于新型甜味剂天苯二肽化合物的合成探索178

实验四十五 菌种合成阿斯巴甜的方法与市场前景180

实验四十六 泰山白首乌活性组分告达庭作为肿瘤化疗增敏剂的初步筛选182

附录一 常用缓冲液的配制方法184

附录二 易变质及需要特殊方法保存的试剂191

附录三 一般化学试剂的分级192

附录四 实验室的常用英语词汇193

参考文献196