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前言1

第一章组织形态学基本技术1

第一节概述1

目 录1

第二节组织形态学研究方法2

一、大体解剖学技术2

二、组织学技术3

三、电子显微镜技术（超薄切片技术）4

四、组织化学与细胞化学技术5

五、细胞凋亡检测5

第三节实验室设备5

一、大体解剖室的设备5

二、组织学实验室设备（切片室设备）6

附实验室工作注意事项7

第一节人体（尸体）解剖技术9

一、尸体固定9

第二章大体解剖技术9

二、一般解剖方法11

三、几种特殊标本的制作方法13

第二节病理尸体解剖与法医病理尸体解剖技术15

一、尸体外表各部位的检验15

二、尸体解剖17

三、病理学及法医病理学系统尸体解剖主要检查内容20

四、几种特殊检查方法24

五、病理学及法医病理学应用举例25

附录27

附1解剖尸体规则27

附2 中华人民共和国公共安全行业标准法医学尸体解剖（GA/T147-1996）28

附3 法医病理学检材的提取、固定、包装及送检方法（GA/T148-1996）35

附4 法医学尸表检验（GA/T149-1996）42

第三章实验动物46

第一节实验动物的处死46

一、实验动物的抓取及固定46

二、实验动物的处死48

一、实验动物的解剖49

第二节标本的取材49

二、取材方法及注意事项50

第三节标本的固定51

一、固定的目的51

二、固定的对象51

四、固定时应注意的事项52

五、几种常用的固定液52

三、固定剂必须具备的性质和条件52

第四章石蜡切片55

第一节石蜡切片组织固定后的处理55

一、组织块修整55

二、洗涤55

三、脱水56

四、透明或媒浸57

五、透蜡（浸蜡）与包埋58

一、石蜡切片前的准备61

第二节石蜡切片61

二、石蜡切片62

三、切片中容易出现的问题、原因及解决方法63

附 火棉胶切片方法64

第三节染色65

一、染色的历史66

二、染料66

三、染色的原理68

四、染色的化学作用69

第五章冰冻切片70

第一节冰冻切片的取材及处理70

一、冰冻切片的取材70

二、组织的速冻71

第二节冰冻切片72

一、常用的冰冻切片方法72

二、冰冻切片的处理72

四、冰冻切片的粘片剂73

五、制作冰冻切片的注意事项73

三、冰冻切片的烤干73

第六章常用的染色方法74

第一节一般常用的染色方法74

一、整体染色法74

二、组织块染色法74

三、蜡带染色法74

四、切片染色法74

五、其他染色方法75

第二节切片染色前的准备75

一、玻璃器皿的清洗75

二、常用染色试剂的配制76

第三节苏木精－伊红染色方法（常规染色法）80

一、苏木精－伊红染色的基本原理80

二、苏木精－伊红染色的基本方法81

三、二甲苯在H-E染色中的作用83

四、酒精在H-E染色中的作用83

六、分化和蓝化84

五、水洗切片的作用84

七、切片制作中出现的问题、原因及解决方法85

第四节几种常用的特殊染色方法85

一、脂类的显示方法86

二、胶原纤维染色法89

三、弹力纤维染色法92

四、网状纤维染色方法94

五、心脏传导系统的染色方法97

七、横纹肌组织染色99

六、早期心肌缺血病变组织染色99

八、羊水角化鳞状上皮细胞的染色100

九、含铁血黄素染色方法103

十、血红蛋白的染色104

十一、纤维蛋白染色105

十二、索沟的染色方法106

十三、乙型肝炎表面抗原染色法107

十四、淀粉样变性的染色方法109

一、瑞特染色法111

第一节涂片染色方法111

第七章非切片染色方法111

二、巴氏染色法112

三、迈－格－吉染色方法113

第二节硅藻的检测方法114

第三节血管注射115

一、取材117

二、固定117

第一节细胞化学和组织化学的基本方法117

第八章细胞化学和组织化学方法117

三、制片119

四、注意事项119

第二节无机物的检测方法119

一、显示组织中钙沉着的方法119

二、铜质显示法120

三、显示铅的玫棕酸法120

四、显示砷的Castel法121

五、显示锌的Okamoto双硫腙法121

一、糖类染色方法122

第三节有机物的检测方法122

二、RNA和DNA的显示方法124

第四节显示酶的组织化学方法126

一、显示碱性磷酸酶的Gomori改良钙－钴法127

二、显示酸性磷酸酶的萘酚AS-BI法128

三、显示非特异性酯酶的六偶氮副品红方法129

四、显示胆碱酯酶的组织化学方法130

五、显示琥珀酸脱氢酶的方法131

第九章超微病理及电子显微镜技术133

第一节医学超微结构与电子显微术发展现状133

第二节电子显微镜的基本结构及功能134

一、生物医学电镜种类134

二、透射式电子显微镜的基本结构及功能135

第三节常规电子显微技术装备136

一、透射电子显微镜136

二、超薄切片机136

一、透射电子显微镜标本常规制备137

第四节超薄切片技术137

三、制刀机137

二、扫描电子显微镜标本常规制备149

第十章免疫组织化学技术概述151

第一节概述151

第二节免疫组织化学基本技术方法151

一、抗体的准备151

三、抗原的修复152

四、染色152

二、组织材料的处理152

第三节免疫组织化学常用试剂和处理方法154

一、固定剂154

二、防脱片剂（黏附剂）154

三、封固剂154

四、酶消化液155

五、其他溶液155

六、过氧化物酶标记显色液156

第四节免疫电镜技术158

七、免疫组织化学染色中常出现的问题及处理方法158

一、组织固定159

二、组织包埋159

三、免疫电镜标记物161

四、免疫染色163

五、其他免疫电镜技术165

第十一章计算机显微图像分析技术166

第一节概述166

第二节显微图像分析系统166

一、显微图像分析系统的组成166

二、数字图像处理原理168

三、图像处理的基本步骤168

四、计算机图像分析测试的注意事项171

第三节 图像分析在生物医学中的应用172

一、常用的定量技术172

二、图像分析在细胞形态与功能的研究中的应用173

二、常用的体视学术语174

一、图像分析与体视学的关系与区别174

第四节图像分析与体视学174

第五节细胞形态测量参数及意义176

第六节图像分析研究设计及实施178

一、图像分析研究的设计178

二、形态定量和图像分析研究的实施179

第七节国内外图像分析仪简介181

一、国内生产图像分析仪的情况简介181

二、国外图像分析仪的情况简介185

一、PCR基本原理186

第十二章PCR技术在生物组织学中的应用186

第一节PCR技术基本原理及操作186

二、PCR的基本操作步骤187

三、PCR基本反应体系188

四、PCR条件的优化188

五、PCR引物设计原则190

六、防止PCR实验中的污染及对策190

三、RNA提取方法191

二、基本实验前的准备191

一、RNA分离的原理191

第二节 RT-PCR技术在生物组织学的应用及操作191

四、RT-PCR196

第三节PCR-SSCP技术在生物组织学的应用及操作198

一、PCR-SSCP的基本原理198

二、PCR-SSCP的种类198

三、注意事项200

四、PCR-SSCP技术在生物组织学中的应用201

第四节原位PCR在生物组织学的应用及操作201

一、原位PCR技术的基本原理201

二、原位PCR的操作方法201

三、原位PCR中应注意的几个问题202

四、原位PCR技术的组织生物学应用203

第五节其他PCR技术简介204

第六节组织DNA的提取方法205

一、新鲜血液中白细胞DNA的提取205

三、甲醛固定或石蜡切片组织DNA提取207

二、新鲜组织及培养组织细胞的DNA提取207

第十三章 电泳技术在组织生物学中的应用及操作210

第一节电泳概述210

一、电泳的概念及基本原理210

二、影响电泳的因素211

第二节 蛋白质电泳技术212

一、SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳212

二、非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳214

三、等电聚焦214

四、蛋白印迹技术215

五、蛋白显色方法216

第三节 DNA电泳技术218

一、琼脂糖电泳218

二、非变性聚丙烯酰胺凝胶220

三、变性聚丙烯酰胺凝胶电泳221

四、DNA电泳显色方法222

五、PAGE凝胶中DNA的回收223

一、毛细管电泳技术及其在蛋白质分析中的应用225

第四节 电泳技术在组织生物学中的研究进展225

二、毛细管电泳在DNA分析中的应用226

第十四章核酸杂交技术在生物组织学中的应用227

第一节核酸杂交技术在生物组织学中的应用概述227

一、核酸杂交技术发展简述227

二、核酸杂交的基本原理228

三、影响核酸杂交的因素228

四、核酸杂交技术在生物组织学中的应用229

二、Southern印迹杂交技术基本步骤230

第二节Southern印迹杂交及技术操作230

一、Southern印迹杂交技术原理230

三、Southern印迹杂交技术在组织生物学中的应用234

第三节Northern印迹杂交技术及操作234

第四节原位杂交技术及操作235

一、原位杂交技术的原理235

二、原位杂交技术的发展历史235

三、原位杂交技术的基本方法235

二、斑点印迹杂交的方法238

第五节斑点杂交技术及操作238

一、斑点印迹杂交的原理238

第六节探针的种类及制备239

一、探针的种类239

二、探针的标记物240

三、标记方法240

第十五章基因芯片技术在组织生物学上的应用及展望242

第一节基因芯片技术的基本原理和类型242

一、基本概念及原理242

二、基因芯片的主要类型242

三、基因芯片检测243

四、基因芯片的制作方法243

第二节基因芯片技术的应用245

一、测序与人类基因组研究245

二、基因芯片在法庭科学上的应用245

三、临床医学诊断245

第三节基因芯片技术展望246

五、发现与疾病相关的新基因246

四、基因芯片与肿瘤研究246

一、技术在不断完善247

二、应用展望247

主要参考文献248

附录250

附录1实验室常用溶液及缓冲液的配制250

一、常用酸溶液的简便配制250

二、常用碱溶液的简便配制251

三、常用盐溶液的配制方法251

四、常用缓冲液的配制252

附录2常用染色剂的名称、性质及作用254

一、常用细胞核染色剂254

二、常用细胞质染色剂255

三、常用脂肪染色剂256

四、常用其他染色剂257

附录3常用试剂中英文对照257