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前言1

第一篇 生物化学实验原理与技术1

第一章 生化分离制备的特点与原理1

第一节 生化分离制备方法的特点1

第二节 生化分离制备方法的原理2

第三节 生化分离制备的分析鉴定方法3

第四节 生化分离制备中材料提取方法的选择4

第五节 生化分离制备中分离纯化方法的选择6

第二章 生物大分子的分离制备8

第一节 蛋白质和酶的提取分离8

一、蛋白质及酶的一般提取方法8

二、蛋白质和酶提取后的纯化12

第二节核酸的提取分离13

一、核酸及其溶解性13

二、提取方法13

第三节 多糖及其他水溶性生化物质的提取分离15

第四节 脂类化合物的提取分离16

第五节 植物次生物的提取及溶剂系统分离的选择17

第三章 生物化学常用实验技术19

第一节 离心技术19

一、基本原理19

二、离心设备20

三、离心方法20

第二节 分光光度法22

一、基本原理22

二、仪器的基本结构23

三、几种常用分光光度计的使用方法24

第三节 层析技术30

一、吸附层析30

二、分配层析32

三、离子交换层析33

四、凝胶过滤36

五、亲和层析37

第四节 电泳技术39

一、电泳原理39

二、聚丙烯酰胺凝胶电泳41

三、几种特殊的聚丙烯酰胺凝胶电泳46

四、琼脂糖凝胶电泳49

五、淀粉凝胶电泳50

六、醋酸纤维素薄膜电泳52

第二篇 实验内容54

实验1 氨基酸的纸层析分离54

实验2 氨基酸纤维素薄层层析57

实验3 植物组织中游离氨基酸总量的测定59

实验4 植物组织中可溶性蛋白质含量的测定62

实验5 植物组织中丙酮酸含量的测定69

实验6 凯式定氮法测定蛋白质含量71

实验7 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法测定蛋白质分子量76

实验8 植物过氧化物酶同工酶的测定81

实验9 醋酸纤维素薄膜电泳分离血清蛋白质85

实验10 酶的性质87

实验11 蔗糖酶米氏常数的测定90

实验12 淀粉酶活力的测定93

实验13 植物组织中DNA的快速提取96

实验14 紫外吸收法测定核酸含量98

实验15 二苯胺法测定DNA含量100

实验16 酵母RNA的提取与鉴定102

实验17 定磷法测定核酸含量104

实验18 苔黑酚法测定RNA含量107

实验19 NA聚合酶链式反应（PCR）技术109

实验20 植物组织中可溶性糖含量的测定111

实验21 植物组织中淀粉含量的测定119

实验22 真菌多糖的提取及测定123

实验23 血清葡萄糖含量的测定125

实验24 维生素C含量的测定127

实验25 粗脂肪的提取和含量测定130

实验26 游离脂肪酸含量的快速测定132

实验27 酮体的生成和利用134

实验28 血清转氨酶活力的测定136

实验29 植物体内的转氨基作用140

实验30 超氧化物酶（SOD）活力的测定142

实验31 过氧化物酶（POD）活力的测定146

实验32 过氧化氢酶（CAT）活力的测定148

实验33 苯丙氨酸解氨酶（PAL）的提取、纯化及活性测定152

实验34 蔗糖酶的分离提纯159

实验35 质粒DNA的提取、酶切及电泳鉴定164

第三篇 附录168

一、实验室安全及防护知识168

二、实验室常识171

三、实验误差与数据处理173

四、玻璃仪器的洗涤及各种洗液的配制法177

五、常用容量玻璃仪器的使用方法179

六、常用溶液混匀方法181

七、常用缓冲溶液的配制方法182

八、常用酸碱的比重（密度）和浓度的关系189

九、常用固态化合物的摩尔浓度配制参考表190

十、常用蛋白质分子量及等电点191

十一、硫酸铵饱和度的常用表193

十二、易变质及需要特殊方法保存的试剂195

参考文献196