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第一章 绪论1

第一节 概述1

第二节 生物化学与分子生物学实验技术发展简史1

第三节 实验的基本要求3

第四节 实验记录和实验报告的撰写8

第二章 实验基本操作技能10

第一节 实验技能的内涵10

第二节 常用玻璃仪器及器皿的使用、洗涤和干燥11

第三节 常用仪器及设备的使用13

第三章 生物化学基本理论15

第一节 层析技术15

第二节 离心技术24

第三节 电泳技术28

第四节 透析和浓缩33

第五节 盐析技术34

第四章 生物化学实验35

实验一蛋白质的盐析与透析35

实验二凝胶层析法分离蛋白质37

实验三酶作用的特异性和影响酶促反应速度的因素38

实验四琥珀酸脱氢酶的作用及丙二酸的竞争性抑制作用41

实验五酮体的生成和氧化43

实验六精氨酸酶在尿素生成中的作用44

实验七维生素C的性质及含量测定46

实验八血钙的测定47

实验九血清胆固醇总量的测定49

实验十双缩脲法测定蛋白质52

实验十一酵母蔗糖酶Km值的测定54

实验十二饱食、饥饿和激素对小鼠肝糖原含量的影响56

实验十三转氨基作用与血清谷丙转氨酶活性的测定57

实验十四赖氏法测定血清丙氨酸氨基转移酶60

实验十五碘－淀粉比色法测定血清淀粉酶62

实验十六血清乳酸脱氢酶同工酶的电泳分离64

实验十七血清蛋白质的凝胶等电聚焦电泳65

实验十八血清蛋白质醋酸纤维素薄膜电泳定量测定67

实验十九聚丙烯酰胺凝胶盘状电泳分离血清蛋白质69

实验二十血清甘油三酯的测定72

实验二十一GPO-PAP法测定血清（浆）甘油三酯74

实验二十二蛋白质含量的测定（凯氏定氮法）76

实验二十三溴甲酚紫法测定血清白蛋白78

实验二十四胡萝卜素的柱层析分离79

第五章 分子生物学基本理论81

第一节 分子生物学实验室需要的仪器配置81

第二节 分子生物学实验基本操作技术84

第三节 基因操作概述88

第六章 分子生物学基本实验93

实验一肝组织核酸的分离与鉴定93

实验二核酸的定量分析94

实验三大肠埃希菌感受态细胞的制备96

实验四DNA的转化及阳性克隆的筛选98

实验五DNA的限制性酶切反应99

实验六多聚酶链式反应（PCR）技术101

实验七RT-PCR扩增目的基因103

实验八实时PCR检测乙型肝炎病毒（HBV）核酸106

第七章 综合性实验109

第一节 综合性实验概述109

第二节 综合性实验109

实验一血清γ－球蛋白的分离提纯109

实验二糖尿病诊断实验111

实验三基因组DNA的分离和含量测定118

实验四RNA的分离和含量测定125

实验五质粒DNA的提取与鉴定132

第八章 设计性实验140

第一节 设计性实验概述140

第二节 设计性实验141

实验一唾液淀粉酶最适pH的测定141

实验二RT-PCR142

第九章 虚拟仿真实验143

第一节 虚拟仿真实验概述143

第二节 虚拟仿真实验144

实验一利用Mapviewer查找人白介素IL-18基因序列、mRNA序列和氨基酸序列144

实验二SLC11A1蛋白跨膜结构域的预测148

实验三抗菌肽LL37的理化性质分析和二级结构预测151

参考文献155

附录156