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上篇 基本实验1

第一章 显微镜的构造和使用1

实验1-1普通光学显微镜的构造、使用方法及细胞基本形态结构的观察1

实验1-2倒置相差显微镜的构造与使用5

实验1-3显微镜测微尺的使用8

第二章 流式细胞仪技术与应用14

实验2-1流式细胞仪结构原理及应用14

实验2-2流式细胞仪检测细胞周期18

实验2-3流式细胞仪检测细胞凋亡19

实验2-4流式细胞仪检测细胞中抗原——流式细胞术检测T淋巴细胞亚群21

第三章 细胞器结构的观察与分离24

实验3-1细胞器结构的观察24

实验3-2细胞器分级分离31

第四章 细胞化学方法和细胞化学成分显示34

实验4-1细胞化学基本理论34

实验4-2细胞中骨架蛋白的显示与细胞形态的观察37

实验4-3 Feulgen法显示脱氧核糖核酸39

实验4-4甲基绿-派洛宁显示核酸41

实验4-5苏木素-伊红染色显示细胞核和细胞质42

第五章 酶细胞化学45

实验5-1酶细胞化学的基本原理45

实验5-2碱性磷酸酶显示及用途47

实验5-3联苯胺法显示过氧化物酶及应用49

实验5-4詹纳斯绿显示活体细胞线粒体50

实验5-5利用琥珀酸脱氢酶活性进行MTT检测细胞相对存活率51

实验5-6 CCK8检测技术53

第六章 免疫化学技术56

实验6-1免疫酶细胞化学法检测髓母细胞瘤细胞系中P65蛋白的表达56

实验6-2免疫荧光染色显示髓母细胞瘤细胞系中HES 1蛋白的分布58

实验6-3免疫组织化学法检测HES 1在胃癌组织中的表达与分布60

第七章 细胞遗传学技术64

实验7-1人类性染色质标本的制备与观察64

实验7-2人外周血淋巴细胞培养与染色体制备66

实验7-3小鼠骨髓细胞染色体标本的制备与观察69

实验7-4染色体G显带技术70

实验7-5核型分析74

第八章 细胞培养技术77

实验8-1细胞培养的基本原理与技术77

实验8-2细胞的原代培养84

实验8-3传代细胞培养85

实验8-4培养细胞的形态观察和计数87

实验8-5细胞冻存、复苏与运输90

实验8-6细胞克隆化培养92

实验8-7细胞三维培养94

第九章 细胞行为学99

实验9-1细胞吞噬实验99

实验9-2细胞融合实验101

实验9-3细胞周期106

实验9-4小鼠减数分裂109

实验9-5细胞周期特定时相细胞同步化方法113

实验9-6细胞运动的观察116

实验9-7肿瘤细胞的迁移和侵袭试验——Transwell小室测定法118

第十章 细胞衰老和凋亡的检测120

实验10-1苏木素-伊红染色法显示凋亡细胞120

实验10-2 Giemsa染色法显示凋亡细胞122

实验10-3凋亡细胞的原位末端转移酶标记法（TUNEL法）123

实验10-4细胞凋亡的琼脂糖凝胶电泳检测125

实验10-5细胞衰老的检测127

第十一章 蛋白质的分离与测定129

实验11-1真核细胞蛋白质提取129

实验11-2双缩脲法测定蛋白质浓度131

实验11-3福林-酚法测定蛋白质浓度132

实验11-4考马斯亮蓝法测定蛋白质浓度134

实验11-5蛋白质印迹免疫分析（Western blot）135

第十二章 核酸的分离、测定与分析139

实验12-1真核生物组织及细胞基因组DNA提取139

实验12-2组织及细胞中RNA的提取140

实验12-3 DNA与RNA含量测定142

实验12-4聚合酶链反应技术（PCR）体外扩增DNA片段143

实验12-5反转录聚合酶链反应（RT-PCR）145

实验12-6实时定量PCR（Real time-PCR）148

下篇 综合实验152

第十三章 小鼠胚胎干细胞培养152

实验13-1小鼠胚胎成纤维细胞的培养152

实验13-2饲养层细胞的制备154

实验13-3小鼠胚胎干细胞的分离及培养155

第十四章IL-6剥夺诱导小鼠B细胞杂交瘤细胞系7TD1细胞凋亡、观察及检测157

实验14-1小鼠B细胞杂交瘤细胞系7TD1细胞复苏与传代培养158

实验14-2 7TD 1细胞的凋亡诱导（IL-6剥夺）及细胞收集160

实验14-3 IL-6剥夺诱导7TD 1细胞凋亡的形态特征观察161

实验14-4 IL-6剥夺诱导7TD 1细胞凋亡的DNA提取及凋亡梯状带检测164

第十五章 观察白藜芦醇对髓母细胞瘤细胞分化、运动、凋亡的影响及相关基因的检测168

实验15-1细胞的培养与传代168

实验15-2白藜芦醇处理前后细胞数量和形态的观察以及免疫细胞化学染色170

实验15-3白藜芦醇对髓母细胞瘤细胞迁移能力的影响172

实验15-4总RNA提取和分化相关基因突触素（synaptophysin）的RT-PCR检测173

第十六章 小鼠表皮细胞原代培养及免疫荧光检测175

实验16-1细胞原代培养（消化法）175

实验16-2细胞传代176

实验16-3细胞的处理及免疫荧光法检测E-cadherin177

实验16-4细胞的显微摄影179

第十七章 应用基因重组技术在真核细胞中表达和检测p53基因182

实验17-1目的基因p53 PCR扩增及琼脂糖凝胶电泳检测183

实验17-2目的基因p53片段纯化回收与重组表达载体连接、转化、筛选及重组质粒提取184

实验17-3培养细胞转染目的基因表达载体187

实验17-4 Western blot方法检测外源目的基因p53表达188

附录191

附录一 试剂浓度的表示方法及其计算191

附录二 常用人工合成细胞培养基的种类、化学组成及适用细胞193

附录三 实验室常用细胞系（株）196

附录四 离心机转数与离心力的换算表199