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第一章 生化技术实训要求与基本技能1

第一节 生化实训应遵守的规则与要求1

一、生化实训室规则及常识1

二、生化实训“六个环节”的基本要求2

第二节 生化实训基本技能4

一、生化实训中常用玻璃仪器的洗涤4

二、常用清洗液5

三、特殊清洗液6

四、吸量管的种类和使用7

五、取液器（pipette）的种类和使用9

六、溶液的混匀11

七、过滤13

复习思考题13

第二章 膜分离技术15

第一节 膜分离基本技术15

一、透析17

二、超滤18

三、微滤19

四、电渗析20

五、反渗透21

六、纳米过滤技术23

复习思考题24

第二节 实训项目24

实训2-1 蛋白质的透析脱盐和超滤浓缩、脱盐24

第三章 层析分离技术33

第一节 层析分离基本技术33

一、分离原理33

二、层析技术的分类33

三、吸附层析35

四、分配层析36

五、离子交换层析37

六、凝胶层析39

七、亲和层析41

八、高效液相层析43

复习思考题46

第二节 实训项目46

实训3-1 纸层析法分离鉴定氨基酸46

实训3-2 糖的薄层层析51

实训3-3 蛋白质溶液的凝胶过滤脱盐55

实训3-4 离子交换层析法分离核苷酸61

第四章 生物化学中的化学检测技术69

第一节 生物化学中的化学检测基本技术69

一、重量法69

二、化学法71

复习思考题74

第二节 实训项目74

实训4-1 总氮量的测定法测定蛋白质的含量——改良微量凯氏定氮法74

实训4-2 总氮量的测定法测定蛋白质的含量——半自动凯氏定氮仪法80

实训4-3 抗坏血酸（维生素C）含量测定85

第五章 电泳技术89

第一节 电泳基本技术89

一、电泳的基本原理89

二、区带电泳91

三、其他电泳技术94

复习思考题96

第二节 实训项目96

实训5-1 蛋白质的聚丙烯酰胺凝胶电泳96

实训5-2 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳测定蛋白质相对分子质量103

实训5-3 血清蛋白质的聚丙烯酰胺等电聚焦电泳110

实训5-4 DNA琼脂糖凝胶电泳113

实训5-5 血清蛋白质的醋酸纤维薄膜电泳117

实训5-6 DNA的膜转移电泳122

实训5-7 蛋白质的膜转移电泳128

第六章 分光光度检测技术135

第一节 分光光度检测基本技术135

一、概述135

二、分光光度检测技术的应用137

复习思考题144

第二节 实训项目144

实训6-1 福林-酚试剂法测定蛋白质含量144

实训6-2 紫外吸收法测定蛋白质含量149

实训6-3 双缩脲法测定蛋白质含量153

实训6-4 淀粉酶活力的测定155

第七章 生物大分子提取与离心沉淀技术160

第一节 生物大分子提取与分离技术160

一、细胞破碎技术160

二、生物大分子提取技术165

三、离心分离技术168

四、沉淀分离技术172

复习思考题177

第二节 实训项目177

实训7-1 大肠杆菌细胞的超声波细胞破碎177

实训7-2 大蒜SOD的分离提取与测活179

实训7-3 DNA的提取184

实训7-4 RNA的提取188

附录192

附录一 实验用水的制备192

附录二 缓冲溶液的配制方法196

附录三 常用的离子交换剂206

附录四 常用的凝胶过滤介质209

附录五 亲和层析常用基质211

附录六 透析袋、微孔滤膜和超滤膜218

附录七 氨基酸及蛋白质的一些物理常数220

附录八 离心机转速与相对离心力换算列线图223

附录九 常用化学试剂的规格、保存、配制及取用224

附录十 实验室常用的干燥剂227

附录十一 实训室常用的生化设备的使用231

主要参考文献242