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第一章 绪论1

一、分子生物学技术在中医药研究中的实例1

二、分子生物学技术在中医药研究中的现状6

三、中医药研究经常使用的分子生物学技术及本书的安排11

四、加强分子生物学技术在中医药研发中的应用，是新时期中医药继承与发展的迫切需要17

第二章 分子生物学常用基本技术21

第一节 重组质粒21

第二节 质粒转化大肠杆菌23

第三节 阳性单菌落扩增与小量DNA制备27

第四节 酶切重组质粒，电泳分离所插入的DNA30

第五节 从凝胶中回收DNA32

附：琼脂糖凝胶DNA回收试剂盒及其方法34

第六节 大量质粒DNA制备35

第七节 哺乳类动物细胞的培养37

附：细胞库简介43

第八节 植物细胞悬浮培养43

第九节 气相色谱-质谱联用47

第十节 流式细胞仪分析49

第三章 DNA的研究方法58

第一节 哺乳类动物基因组DNA的提取58

第二节 植物基因组DNA的提取62

第三节 基因组文库的建立与筛选65

第四节 DNA印迹杂交76

第五节 聚合酶链式反应80

附：多重PCR84

第六节 DNA双脱氧链终止法测序86

第七节 动、植物药材的ISSR指纹图谱95

第八节 中药RAPD指纹图谱100

第四章 RNA的研究方法104

第一节 总RNA提取105

第二节 mRNA的分离107

第三节 RNA印迹杂交110

第四节 反转录聚合酶链式反应115

第五节 荧光实时定量PCR118

第六节 原位杂交123

第七节 基因芯片127

第八节 cDNA矩阵137

第九节 差异展示PCR141

第十节 cDNA库建立145

第十一节 基因全序列cDNA库筛选154

第十二节 迅速扩增cDNA末端的PCR技术159

第五章 蛋白质的研究方法164

第一节 哺乳类动物组织蛋白质的提取164

第二节 植物组织蛋白质的提取167

第三节 蛋白质印迹杂交169

第四节 酶联免疫吸附试验181

第五节 免疫组织化学185

第六节 单克隆抗体制备技术191

第七节 蛋白质双向电泳199

第六章 基因功能与表达调控的研究方法215

第一节 RNA干扰216

第二节 smallRNA的提取与分析226

第三节 报道基因与基因调控元件的检测231

第四节 点突变PCR236

第五节 基因敲除241

第六节 DNA酶I足迹法246

第七节 凝胶阻滞分析252

第八节 植物细胞的基因转化259

第七章 分子生物学常用网络资源及利用268

第一节 美国国家生物技术信息中心（NCBI）268

第二节 GenBank数据库查询与搜索274

第三节 基础局部比对搜索工具（BLAST）280

第四节 EST的电子延伸289

第五节 cDNA序列的蛋白阅读框架分析（ORF）、染色体定位，及其在机体各组织中的表达预测294

第六节 PCR引物或序列寡核苷酸探针的在线设计300

第七节 蛋白质分析302

附录306

一、分子生物学实验常用仪器设备306

二、常用生物学数据307

三、常用载体310

四、分子克隆常用酶311

五、常用储存液的配制315

六、常用液体培养基316

七、常用缓冲液317

八、常用酸碱溶液的浓度与分子量317

九、不同浓度酸碱液的pH值317

十、核酸的纯化（用酚/氯仿抽提）318

十一、核酸浓缩318

十二、分光光度法测定DNA及RNA含量319

十三、Sephadex的水化319

十四、放射性度量单位和数据319

十五、科学单位319

十六、离心速度和离心力换算320

十七、分子生物学名词术语英汉对照320