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第一章 核酸体外扩增技术的发展1

第二章 PCR基本技术5

第一节 PCR的原理与操作5

第二节 PCR条件的优化7

第三节 PCR引物的设计15

第四节 耐热DNA聚合酶23

第五节 PCR污染的对策28

第六节 PCR标本的制备31

第七节 PCR扩增产物的分析法39

第八节 引物的5＇端修饰法50

第九节 探针的PCR标记法56

第十节 碱基替代PCR59

第十一节 基因组DNA的扩增61

第十二节 RNA的扩增63

第十三节 古DNA的扩增65

第十四节 未知序列的扩增68

第十五节 简并引物与应用79

第十六节 用不对称PCR产生单链DNA83

第十七节 PCR相关技术86

第三章 其他核酸体外扩增技术91

第一节 转录依赖的扩增系统91

第二节 自主序列复制系统94

第三节 链替代扩增反应95

第四节 连接酶链反应98

第五节 Qβ复制酶系统100

第六节 循环探针反应103

第四章 PCR技术在分子生物学研究中的应用106

第一节 PCR克隆技术106

第二节 PCR直接测序技术113

第三节 定量PCR125

第四节 PCR体外定点突变技术134

第五节 突变的分子水平分析139

第六节 cDNA文库的构建与筛选143

第七节 用PCR构建载体146

第八节 用源重组子检测与PCR赝物147

第九节 DNasel足迹分析151

第十节 PCR模板的体外转录153

第十一节 PCR在染色体区带特异性克隆中的应用155

第十二节 PCR-SSCP在基因分析中的应用160

第五章 PCR在医学细菌、支原体、衣原体、立克次体、螺旋体和寄生虫检测中的应用163

第一节 用PCR直接检测标本中的大肠杆菌163

第二节 用PCR检测痢疾和侵袭性大肠杆菌167

第三节 用PCR检测沙门菌属杆菌171

第四节 小肠结肠炎耶尔森菌和假结核耶尔森菌的PCR检测法172

第五节 用PCR检测霍乱弧菌CT操纵子173

第六节 创伤弧菌的PCR扩增检测法174

第七节 用PCR法检测荧光素酶基因和制备发光菌种特异性杂交探针176

第八节 用PCR检测嗜水气单胞菌的aer基因178

第九节 用PCR结合DNA探针检测杀鲑气单胞菌180

第十节 用PCR快速诊断脑膜炎双球菌181

第十一节 PCR在不同血清型脑膜炎奈瑟菌外膜蛋白1的比较研究中的应用182

第十二节 淋球菌的PCR检测185

第十三节 PCR在金黄色葡萄球菌各种毒素检测中的应用190

第十四节 用PCR检测凝固酶阴性耐甲氧西林葡萄球菌193

第十五节 用PCR检测绿脓杆菌195

第十六节 用PCR检测肺炎杆菌196

第十七节 用PCR检测水中存活的嗜肺军团杆菌198

第十八节 用PCR直接检测支气管灌洗液中的军团菌201

第十九节 布鲁菌的PCR检测方法203

第二十节 单核增生李斯特菌的PCR检测206

第二十一节 结核杆菌的PCR检测211

第二十二节 麻风杆菌的PCR检测215

第二十三节 用PCR检测副结核杆菌217

第二十四节 用PCR检测炭疽杆菌芽胞220

第二十五节 用PCR预测苏云金杆菌杀虫因子活性221

第二十六节 用PCR检测幽门螺杆菌224

第二十七节 PCR在区别不同莫拉菌纤毛基因倒位区序列中的应用226

第二十八节 PCR在艰难梭菌研究中的应用229

第二十九节 据16S rDNA PCR产物的限制性酶切位点差异对梭状芽孢杆菌分类231

第三十节 用PCR特异检测B型肉毒杆菌232

第三十一节 PCR在拟杆菌研究中的应用233

第三十二节 用PCR结合特异的DNA探针鉴定嗜常温乳酸细菌235

第三十三节 用PCR-RFLP鉴定乳腺链球菌与副乳腺链球菌236

第三十四节 用PCR检测胸膜肺炎放线杆菌237

第三十五节 PCR在莱姆病研究中的应用238

第三十六节 用PCR检测临床标本中的钩端螺旋体242

第三十七节 用PCR检测梅毒螺旋体244

第三十八节 肺炎支原体的PCR检测249

第三十九节 用PCR鉴定肺炎支原体和生殖器支原体252

第四十节 用PCR从脓毒性关节炎病人的标本中检测解脲脲原体254

第四十一节 用PCR检测发酵支原体255

第四十二节 用PCR检测衣原体DNA256

第四十三节 两步PCR检测和鉴别鹦鹉热衣原体菌株258

第四十四节 用PCR直接检测印度客蚤体内的莫氏立克次体261

第四十五节 用PCR诊断流行性斑疹伤寒264

第四十六节 用PCR检测恙虫病立克次体266

第四十七节 用PCR检测洛矶山斑点热临床标本267

第四十八节 PCR在Q热立克次体检测及鉴定中的应用269

第四十九节 用PCR检测感染马标本中的埃里希体273

第五十节 用PCR检测人埃氏菌病的致病因子274

第五十一节 PCR在弗兰克菌遗传种系亲缘关系研究中的应用276

第五十二节 用PCR检测临床标本中的疟原虫278

第五十三节 用PCR检测致病性阿米巴280

第五十四节 用PCR检测鼠弓形虫282

第五十五节 卡氏肺孢子虫肺炎的PCR诊断284

第五十六节 用PCR检测利什曼原虫286

第五十七节 用PCR检测锥虫288

第六章 病毒学291

第一节 应用通用引物PCR方法检测生殖道人乳头瘤病毒291

第二节 人类巨细胞病毒的PCR检测296

第三节 用PCR分型检测单纯疱疹病毒300

第四节 用套式PCR检测单纯疱疹病毒304

第五节 用PCR-EC分型检测疱疹病毒306

第六节 用RAN-PCR检测单纯疱疹病毒308

第七节 EB病毒基因组的PCR检测310

第八节 水痘-带状疱疹病毒的PCR检测314

第九节 用PCR检测人B19病毒316

第十节 PCR在婴幼儿腺病毒性腹泻检测中的应用319

第十一节 乙型肝炎病毒的PCR检测322

第十二节 丙型肝炎病毒的PCR检测327

第十三节 丙型肝炎病毒的RT/PCR诊断334

第十四节 人粪便标本中戊型肝炎病毒的RT/PCR直接检测336

第十五节 PCR在人类免疫缺陷病毒中的应用339

第十六节 用PCR检测人血标本中HTLV前病毒序列352

第十七节 PCR在黄病毒检测和研究中的应用355

第十八节 风疹病毒的PCR检测360

第十九节 人细小RNA病毒基因组的PCR扩增362

第二十节 PCR在流行性出血热研究中的应用367

第二十一节 PCR应用于粪便标本中轮状病毒的检测368

第二十二节 用PCR检测蓝舌病毒370

第二十三节 PCR在新病毒鉴定中的应用373

第七章 PCR技术在遗传病基因分析及诊断中的应用378

第一节 地中海贫血的基因诊断378

第二节 苯丙酮尿症381

第三节 杜氏/贝氏进行性肌营养不良385

第四节 血友病392

第五节 性别发育异常397

第六节 脆-X综合征401

第七节 α1抗胰蛋白酶缺陷症403

第八节 马凡综合征406

第九节 PCR技术在线粒体病诊断中的应用407

第八章 PCR在白血病检测中的应用417

第一节 用PCR检测白血病时T细胞受体β链基因重排417

第二节 用PCR检测白血病时TCRγ链基因重排419

第三节 用PCR检测白血病时TCRδ链基因重排422

第四节 用PCR检测白血病时免疫球蛋白重链基因CDR-Ⅲ序列重排424

第五节 用PCR检测白血病时免疫球蛋白重链基因重排426

第六节 用PCR检测白血病时t(1;19)(q23;p13)染色体易位产生的E2A/PBX 1融合mRNA427

第七节 用PCR检测白血病时t(10;14)(q24;q11)染色体易位429

第八节 用PCR检测B细胞肿瘤时t(14;18)染色体易位430

第九节 用PCR检测白血病时bcr-abl融合基因的mRNA序列432

第十节 用PCR检测白血病时ras癌基因突变433

第十一节 用PCR检测人类T淋巴细胞白血病病毒438

第十二节 用PCR检测AML和MDS人FMS基因突变440

第十三节 用PCR检测急性早幼粒细胞白血病RARα/myl融合基因的mRNA序列442

第十四节 用PCR-RFLP法测定ras突变443

第十五节 用PCR检测急性白血病p53基因突变444

第一节 骨髓移植与HLA446

第九章 PCR在骨髓移植HLA-D位点配型中的应用446

第二节 用PCR/SSOPH法进行骨髓移植HLA-D位点配型447

第三节 PCR/SSOPH反向杂交在骨髓移植配型中的应用450

第四节 用PCR-指纹图法进行骨髓移植HLA-DRβ快速配型453

第十章 PCR技术在法庭科学中的应用454

第一节 法医学生物样品中DNA的制备454

第二节 PCR在HLA-DQα分型中的应用458

第三节 载脂蛋白B(Apo B)基因高变区的扩增及其在法庭科学中的应用461

第四节 随机引物在DNA扩增及多态性分析中的应用462

第五节 基因组中简单重复DNA序列多态性在法医学斑迹检验中的应用464

第六节 小卫星重组编码序列在DNA多态性分析中的应用467

第七节 等位基因特异的DNA扩增技术在性交混合分泌物分析中的应用472

第八节 人类SRY基因的检测及其在法庭科学性别鉴定中的应用475

第九节 用PCR技术扩增DYZ1 DNA进行性别鉴定476

第十一章 PCR在组织与群体生物学研究中的应用479

第一节 PCR在生物分类学中的应用479

第二节 PCR在群体生物学中的应用482

第三节 PCR在动物保护中的应用483

第四节 PCR在生态学研究中的应用484

第十二章 PCR在植物学中的应用486

第一节 PCR在大麦黄矮病毒外壳蛋白基因克隆中的应用486

第二节 PCR在大麦黄矮病毒基因序列分析中的应用488

第三节 用PCR检测蚜虫中的大麦黄矮病毒491

第四节 用PCR检测大麦黄矮病毒组中的病毒493

第五节 用PCR检测甜菜西方黄化病毒495

第六节 用PCR检测菜豆黄色花叶病毒497

第七节 用PCR检测李痘病毒499

第八节 用简并引物PCR法鉴定马铃薯Y组病毒501

第九节 用PCR检测和鉴定玉米条斑及相关双联病毒503

第十节 RCR用于黄瓜花叶病毒RNA体外转录的侵染性研究506

第十一节 PCR在类病毒检测中的应用509

第十二节 PCR在土传真菌病害检测中的应用513

第十三节 用PCR构建cDNA基因文库研究线虫侵染的植物根基因的表达515

第十四节 用PCR和含有脱氧肌苷简并引物研究蕃茄中抗根节线虫的分子标记酸性磷酸酶518

第十五节 用反向PCR快速估计转基因植物在转化早期的T-DNA复制数521

第十六节 用PCR鉴定玉米叶绿体tRNA的加工中间产物和剪接位点523