图书介绍

基因工程2025|PDF|Epub|mobi|kindle电子书版本百度云盘下载

朱旭芬，吴敏，向太和编著著
出版社：北京：高等教育出版社
ISBN：7040408485
出版时间：2014
标注页数：221页
文件大小：41MB
文件页数：232页
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图书目录

绪论1

一、基因工程研究进展1

二、遗传物质的性质与存在方式2

三、基因及基因表达5

第一章工具酶12

第一节限制与修饰酶12

一、限制性内切酶12

二、甲基化酶16

第二节 DNA连接酶17

第三节聚合酶19

一、DNA聚合酶19

二、RNA聚合酶22

第四节核酸酶23

第五节核酸末端修饰酶25

第六节其他酶27

第二章分子克隆载体29

第一节质粒载体29

一、概述29

二、几种重要的质粒31

第二节噬菌体载体31

一、λ噬菌体31

二、黏粒35

三、丝状噬菌体36

四、噬菌粒36

第三节真核生物载体38

一、酵母载体38

二、植物细胞载体40

三、动物细胞载体40

第四节人工染色体41

第三章核酸提取与基因文库构建46

第一节核酸的制备46

一、核酸的提取46

二、核酸的检测48

第二节基因文库的构建53

一、基因文库54

二、构建基因文库的载体55

三、基因组文库的构建58

四、cDNA文库的构建60

五、微量样品cDNA文库的构建66

六、基因组文库与cDNA文库的适用范围与差别67

第四章靶基因的克隆策略68

第一节靶基因的克隆68

一、靶基因的部分片段获取68

二、PCR合成法69

三、核酸探针筛选74

四、基因功能筛选76

五、图位克隆法81

六、人工化学合成法83

第二节克隆基因的序列分析84

一、DNA序列测定84

二、基因序列分析85

第五章体外DNA重组91

第一节 DNA重组91

一、载体的选择91

二、靶基因的获取92

三、DNA的体外重组92

第二节重组DNA导入宿主97

一、宿主的选择97

二、重组DNA导入宿主101

第三节阳性重组体的筛选与鉴定104

一、平板筛选法104

二、电泳筛选法106

三、PCR筛选法107

四、测序确认107

五、报告基因检测法107

六、核酸探针筛选法107

七、基因定点突变108

第六章靶基因的诱导表达111

第一节外源基因表达涉及的因素111

一、正确的阅读框111

二、靶基因的有效转录111

三、靶基因转录的终止114

四、mRNA的有效翻译115

五、密码子的利用与偏爱116

六、翻译后的修饰加工及表达蛋白的分泌116

七、蛋白质大小与融合标签117

第二节大肠杆菌表达体系117

一、表达载体118

二、表达用的宿主菌121

第三节外源基因在大肠杆菌中的表达123

一、表达重组载体的构建123

二、外源基因的诱导表达124

三、大肠杆菌中外源基因的表达类型125

四、外源基因表达的检测129

第四节外源基因在真核生物中的表达129

一、酵母表达体系129

二、动植物细胞表达体系132

第七章表达蛋白的纯化134

第一节蛋白质纯化134

一、细胞破碎135

二、破胞后处理137

三、蛋白质浓缩139

四、蛋白质分离140

第二节蛋白质分析146

一、SDS-PAGE分析146

二、Western杂交148

三、蛋白质含量测定149

四、蛋白质浓缩与贮存150

第八章转基因152

第一节植物转基因152

一、植物转基因的载体152

二、植物转基因的受体157

三、DNA重组157

四、外源DNA导入植物细胞158

五、植物转基因筛选与植株分化161

第二节动物转基因161

一、表达载体162

二、哺乳动物细胞169

三、外源基因导入动物细胞170

四、外源基因的诱导表达174

第九章基因组、转录组和蛋白质组的研究175

第一节基因组175

一、测序文库的构建176

二、基因组测序176

三、测序后数据组装184

四、内洞修补、拼接185

五、全基因组注释185

第二节转录组187

一、微阵列技术189

二、SAGE和MPSS技术189

三、转录组测序技术191

第三节蛋白质组193

一、双向电泳194

二、生物质谱技术197

三、SILAC技术198

四、iTRAQ技术199

五、蛋白质芯片技术200

六、酵母双杂交技术200

七、噬菌体展示技术201

八、基因靶向201

第十章基因工程应用与思考206

第一节基因工程的应用206

一、医药卫生206

二、农牧业、食品工业208

三、环境保护208

第二节转基因的安全性分析209

一、剖析与转基因产品安全性有关的十大事件209

二、转基因的安全性问题212

三、转基因的安全性管理214

参考文献216

索引219