免疫荧光基础 实验新原理及其临床新应用 第2版2025|PDF|Epub|mobi|kindle电子书版本百度云盘下载

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第1章　免疫荧光基础与技术导言1

1.1　原发与继发荧光1

1.2　免疫荧光原理1

1.3　免疫荧光术语3

1.4　直接免疫荧光主要过程简述3

第2章　抗体制备及用荧光染料标记4

2.1　抗体的结构与功能4

缩写词6

2.2　抗血清的制备6

2.3　从血清中分离免疫球蛋白6

目录6

2.4.1.2　异硫氰酸荧光素8

2.4.1.3 四甲基异硫氰酸若丹明（TRITC）8

2.4.1.4　其他荧光染料8

2.4.1.1　荧光染料的要求8

2.4.1 荧光染料8

2.4　抗血清的荧光染料标记8

2.4.2 与FITC偶联9

2.4.3 与TRITC偶联10

2.5　偶联物的净化11

2.5.1 用葡聚糖凝胶G-25和G-50作凝胶过滤11

2.5.2　用生物胶P-6作凝胶过滤12

2.5.3 在DEAE葡聚糖凝胶A-50上进行分级12

2.5.4　吸附与免疫学净化13

2.6　稀释蛋白溶液的浓缩14

第3章　抗血清与偶联物的鉴定和质量监测15

3.1　偶联物的认定指标15

3.2　鉴定抗血清的方法15

3.2.1　游离染料的测试15

3.2.2 染料／蛋白比例的测定（F/P系数）16

3.2.2.1 对FITC偶联物F/P系数的测定16

3.2.2.2 对TRITC偶联物的克分子F/P比的测定18

3.2.2.3　其他荧光染料偶联物的F/P比值的测定18

3.2.3　用醋酸纤维素薄膜电泳测定蛋白质分布19

3.2.4　用琼脂凝胶双向免疫扩散法检测抗血清的活性20

3.2.5 用反向免疫扩散法检测抗体浓度21

3.2.6　用标准凝胶双向扩散法检测抗体蛋白含量的沉淀单位21

3.2.7　用抗原偶联于人工底物法作特异性检查——DASS法22

3.2.8　用生物系统作特异性检查22

3.2.8.1　骨髓细胞检查22

3.2.8.2　膜免疫荧光的专用检查23

3.3　适用性的偶联物最佳工作浓度检测法23

第4章　免疫荧光技术28

4.1　血清的保存28

4.2　切片的准备与制作28

4.2.1 切片技术28

4.2.1.1 冷冻切片28

4.2.1.2　石蜡包埋30

4.2.2.2　室温下免固定的简单间接法的步骤31

4.2.2.1　直接法的步骤31

4.2.1.3　冷冻干燥31

4.2.2　免疫组织学染色31

4.2.2.3 “双”间接法检测补体结合抗体32

4.2.2.4　特殊方法33

4.2.3　背景染色与后染色34

4.2.4　包埋34

4.3　膜免疫荧光标本的准备与制作34

4.3.1.2　孵育35

4.3.1.3　包埋与永久性标本的制备35

4.3.1.1　淋巴细胞的分离35

4.3.1　淋巴细胞的膜免疫荧光35

4.3.2　肝细胞的膜免疫荧光36

4.3.2.1　肝细胞的制备36

4.3.2.2　孵育36

4.4　免疫荧光检查中的额外荧光与特异性监测36

4.4.1 用以检测抗体的间接免疫荧光的监测37

4.4.2　直接免疫荧光的监测37

4.4.3　检验补体结合抗体的监测38

5.1 显微镜39

第5章　仪器技术与检查结果的记录39

5.2　附属器械42

5.2.1　显微摄影装置42

5.2.2　共聚焦激光扫描荧光显微镜检查43

第6章　一般注意事项47

6.1　血清、抗体、偶联物和抗原底物47

6.2　检测结果的提取47

第7章　免疫荧光的应用49

7.1　应用领域概述49

7.2　免疫活性物在活检材料中的验证49

7.2.1 肾活检49

7.2.2　肝活检54

7.2.3　皮肤活检59

7.3　循环抗体的验证63

7.3.1.1　抗肝细胞膜抗体64

7.3.1　抗细胞膜抗原的抗体64

7.3.1.2　抗甲状腺细胞膜抗体65

7.3.1.3　抗胰岛细胞膜抗体65

7.3.1.4　抗淋巴细胞膜抗体65

7.3.1.5　抗肿瘤细胞膜抗体65

7.3.2　抗细胞质成分抗体65

7.3.2.1　抗甲状腺抗原的抗体65

7.3.2.2　抗胃细胞抗体68

7.3.2.3　抗胰腺细胞抗体70

7.3.2.4　抗肾上腺、睾丸、卵巢及胎盘等类甾醇生成细胞的抗体71

7.3.2.5　抗甲状旁腺细胞抗体73

7.3.2.6　抗垂体细胞抗体73

7.3.2.7　抗下丘脑细胞抗体74

7.3.2.8　抗涎腺导管细胞抗体74

7.3.2.9　抗肾细胞抗体75

7.3.2.10　抗肠细胞抗体80

7.3.2.12　抗神经组织抗体82

7.3.2.11　抗子宫内膜抗体82

7.3.2.13　抗视网膜细胞抗体84

7.3.2.14　抗粒细胞及单核细胞抗体86

7.3.2.15　抗血小板抗体89

7.3.2.16　抗肝细胞胞浆抗体90

7.3.2.17　抗内质网（肝及肾微粒体）抗体91

7.3.2.18　抗线粒体抗体96

7.3.2.19　抗核糖体抗体101

7.3.3　抗细胞核抗体102

7.3.3.1　伴核膜荧光的抗体107

7.3.3.2　伴均匀核荧光的抗体108

7.3.3.3　伴斑状核荧光的抗体110

7.3.3.4　伴点状核荧光的抗体112

7.3.3.5　伴抗核仁荧光的抗体115

7.3.3.6　伴核分裂相关荧光的抗体116

7.3.4.1　伴颗粒状胞浆荧光的抗体123

7.3.4　抗培养细胞胞浆抗原的抗体123

7.3.4.2　伴线状胞浆荧光的抗体126

7.3.5　抗特殊成分的抗体126

7.3.5.1　抗精子抗体126

7.3.5.2　抗表皮抗体131

7.3.5.3　抗平滑肌抗体140

7.3.5.4　抗骨骼肌抗体146

7.3.5.5　抗心肌抗体150

7.3.5.7　抗结缔组织抗体151

7.3.5.6　抗血管内皮抗体151

7.3.5.8　抗肾小球基底膜抗体156

7.3.5.9　抗肾小管基底膜抗体161

7.3.5.10　抗胆管、胆管上皮及胆小管抗体161

7.4　淋巴细胞免疫球蛋白受体的检测166

7.5　球形人造底物荧光168

7.5.1 用联接半抗原的葡聚糖凝胶小球检测抗D-青霉胺抗体170

7.6　用C-反应蛋白检测补体活化170

参考文献173