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目录1

第1章　免疫分析1

1.1 抗原1

1.1.1 抗原的概念1

1.1.2 抗原的分类2

1.1.3　抗原的性质4

1.1.4 抗原的特异性与交叉反应5

1.1.5 抗原的制备方法6

1.2 抗体8

1.2.1 免疫球蛋白（Ig）的分子结构8

1.2.2　Ig的血清型与多样性9

1.2.3 Ig的生物学活性11

1.2.4 各类免疫球蛋白的特性与功能11

1.2.5 人工制备的抗体类型14

1.2.6 抗体的制备方法15

1.3 抗原-抗体结合反应18

1.3.1 抗原-抗体结合反应的原理18

1.3.2 抗原-抗体结合反应的特点19

1.3.3 影响抗原-抗体结合反应的因素19

1.4 免疫分析20

1.4.1 免疫分析的类型20

1.4.2 免疫分析的方法21

1.4.3 根据免疫分析中是否引入标记物进行分类22

1.5 非标记免疫分析22

1.5.1 沉淀反应22

1.5.2 免疫扩散23

1.5.3 免疫电泳24

1.5.4 免疫浊度25

1.6　标记免疫分析26

1.5.5 凝集反应26

1.7.1 胶体金标记免疫分析27

1.7 免疫分析新方法27

1.7.2 脂质体放大免疫分析29

1.7.3 流动注射免疫分析34

1.7.4 免疫-PCR技术37

1.7.5 毛细管电泳免疫分析39

1.7.6 多组分免疫分析43

1.7.7 控温相免疫分析44

1.7.8 免疫微球分析法45

参考文献45

2.1.1 酶的基本概念48

2.1.2 酶的发展历史48

2.1 酶的基本概念与发展历史48

第2章　免疫分析常用酶48

2.1.3 酶在生命活动中的作用49

2.2 酶催化作用的特点50

2.2.1 酶催化作用的专一性50

2.2.2 酶催化作用的高效性52

2.2.3 酶催化作用条件的温和性52

2.3 酶的分类与命名53

2.3.1 蛋白类酶的分类与命名53

2.3.2 核酸类酶的分类54

2.4 酶催化反应动力学55

2.5 影响酶催化反应的因素58

2.5.1 温度58

2.5.2 酸度58

2.5.4 酶的活化59

2.5.3　底物及酶的浓度59

2.5.5 酶活性的抑制60

2.6 酶活性的测定61

2.6.1 酶的活性单位61

2.6.2 酶的转换数与催化周期61

2.6.3 酶活性的测定方法62

2.6.4 酶活性测定的意义63

2.7 免疫分析常用酶64

2.7.1 过氧化物酶65

2.7.2　酸性磷酸酶66

2.7.3　碱性磷酸酶67

2.7.4　β-D-半乳糖苷酶69

2.7.5 葡萄糖氧化酶70

2.7.6 脲酶72

2.7.7 青霉素酶73

2.7.8　过氧化氢酶74

2.7.9 葡萄糖淀粉酶75

2.7.10 碳酸酐酶75

2.7.11 乙酰胆碱酶76

2.7.12 葡萄糖6-磷酸脱氢酶77

2.7.13 溶菌酶78

2.7.14 苹果酸脱氢酶79

2.7.15 无机焦磷酸酶79

2.7.16 荧光素酶80

2.7.17 丙酮酸激酶81

参考文献82

3.1 光度酶联免疫分析法（ELISA）的基本类型及原理84

3.1.1　双抗体夹心法84

第3章　光度酶联免疫分析84

3.1.2 间接法85

3.1.3 竞争法85

3.1.4 异种动物双抗体夹心法86

3.1.5　抗酶抗体法86

3.1.6 竞争性抑制法87

3.1.7 双夹心法87

3.1.8　抗原直接包被法88

3.2 ELISA法的发展89

3.2.1 斑点ELISA法89

3.2.2 单克隆抗体捕获ELISA法89

3.2.3 聚合酶链式反应ELISA法90

3.3 ELISA法实验技术的改进91

3.3.2 双显色ELISA法91

3.3.1 快速ELISA诊断试剂盒91

3.2.6 C1q-ELISA法91

3.2.5 A蛋白法91

3.2.4 F（ab′）2-ELISA法91

3.3.3 振荡态ELISA法92

3.3.4 离心加速ELISA法92

3.3.5 磁微粒ELISA法92

3.3.6 其他快速ELISA法93

3.3.7 ELISA和其他分析技术结合94

3.4　ELISA放大系统94

3.4.1 生物素-亲和素系统94

3.4.2 碱性磷酸酶放大系统95

3.4.3 凝血因子的级联放大系统95

3.4.4 微粒放大95

3.5 ELISA实验条件和技术要点96

3.5.1 固相载体的选择和试剂的制备96

3.4.5 催化沉积96

3.5.2 反应条件的选择和方法的标准化103

3.6 质量控制108

3.6.1 酶免疫测定的干扰因素与对策108

3.6.2 ELISA中阴性本底的形成原因和消除方法111

3.6.3 确定ELISA试验阳性临界值113

3.6.4 缩小ELISA检测误差115

3.6.5　结果分析116

3.7 ELISA的应用119

3.7.1 ELISA在医学检测中的应用119

3.7.2 ELISA在食品检测中的应用120

3.7.3 ELISA在水产品检测中的应用122

3.7.4 ELISA在植物病毒检测中的应用125

3.7.5 ELISA在动物检疫检测中的应用127

3.7.6 ELISA在农药残留检测中的应用127

3.7.7 ELISA在兽药残留检测中的应用129

3.7.8 ELISA在捕食作用研究中的应用133

3.8 ELISA分析仪器136

3.8.1 分离式酶联免疫仪器137

3.8.2 组合式的酶联免疫仪器139

3.8.3 Micro plate仪器发展的某些动态140

参考文献141

第4章　化学发光酶联免疫分析142

4.1 化学发光免疫分析概述142

4.1.1 标记化学发光物质的化学发光免疫分析143

4.1.3 化学发光酶联免疫分析144

4.1.4 电化学发光免疫分析144

4.1.2 标记荧光物质的荧光化学发光免疫分析144

4.2 化学发光剂145

4.2.1 吖啶酯类化合物146

4.2.2 氨基苯二酰肼类化合物149

4.2.3 咪唑类化合物151

4.2.4 苯酚类化合物151

4.2.5 芳基草酸酯类化合物151

4.3 化学发光酶联免疫分析152

4.3.1 标记过氧化物酶的化学发光酶联免疫分析153

4.3.2 标记葡萄糖氧化酶的化学发光酶联免疫分析156

4.3.3 增强化学发光酶联免疫分析158

4.4 化学发光酶联免疫分析的应用160

4.4.1 化学发光酶捕获免疫测定大肠杆菌160

4.4.2 偶合反应化学发光酶联免疫分析测定人血清甲胎蛋白161

4.4.3 增强化学发光酶联免疫分析法测定人绒毛膜促性腺激素162

4.4.4 增强化学发光酶联免疫分析法测定血清中的铁蛋白164

4.5 生物发光酶联免疫分析164

4.5.1 荧光素酶-FMN细菌生物发光体系166

4.5.2 荧光素-荧光素酶生物发光体系167

4.6 化学发光定量分析仪器概述169

4.6.1 程控网络主要特点及应用方法169

4.6.2 ACS-180化学发光分析系统172

4.6.3 ACS-180化学发光免疫分析系统工作原理172

参考文献173

第5章　荧光酶联免疫分析175

5.1 荧光免疫分析175

5.1.1 荧光免疫分析的原理175

5.1.2 几种常见的荧光标记物177

5.1.3 荧光免疫分析技术179

5.2.1 荧光酶联免疫分析的原理187

5.2 荧光酶联免疫分析187

5.2.2 荧光酶联免疫分析对荧光底物的要求188

5.2.3 荧光酶联免疫分析的仪器188

5.2.4 荧光酶联免疫分析与普通酶免疫分析的比较189

5.3 荧光酶联免疫分析的应用190

5.3.1 荧光酶联免疫分析测定血清中的肝癌细胞190

5.3.2 微粒子荧光酶联免疫分析法定量检测乙型肝炎E抗原191

5.3.3 氯化血红素作为模拟酶荧光免疫分析测定乙型肝炎表面抗原192

5.3.4 应用全自动荧光酶联免疫分析系统同时检测艾滋病毒抗体和p24抗原193

5.3.5 荧光酶联免疫分析测定人血清乙型肝炎表面抗原及抗体195

参考文献197

第6章 电化学酶联免疫分析200

6.1 电化学免疫分析200

6.1.1 异相电化学免疫分析法201

6.1.2 均相电化学免疫分析法202

6.1.3 电化学酶联免疫分析203

6.2 伏安酶联免疫分析法204

6.2.1 伏安法测定基本原理204

6.2.2 以HRP为标记酶的伏安酶联免疫分析法209

6.2.3 以AP为标记酶的伏安酶联免疫分析法226

6.2.4 其他酶标记的伏安酶联免疫分析法229

6.2.5 伏安酶联免疫分析法在植物病毒血清学检测中的应用230

6.2.6 伏安酶联免疫分析法在其他方面的应用233

6.3 安培酶联免疫分析法235

6.3.1 安培法测定基本原理235

6.3.2 安培酶联免疫分析常用的酶-底物体系236

6.3.3 高效液相色谱安培酶联免疫分析236

6.3.4 流动注射安培酶联免疫分析237

6.3.6 安培酶联免疫分析法的应用238

6.3.5 毛细管电泳安培酶联免疫分析238

6.4 电化学酶联免疫分析和其他技术的联用241

6.4.1 毛细管电化学酶联免疫分析241

6.4.2 磁微粒电化学酶联免疫分析242

参考文献242

第7章　酶免疫传感器245

7.1 生物传感器的原理与分类245

7.1.1 生物活性物质的分子识别功能246

7.1.2 生物活性物质的固定化技术248

7.1.3 信号转换器的基本类型256

7.2 酶免疫传感器的基本原理256

7.2.1 酶传感器256

7.2.2 免疫传感器256

7.3.1 电化学信号转换器的基本原理259

7.3 电化学酶免疫传感器259

7.2.3　酶免疫传感器259

7.3.2 电化学酶传感器261

7.3.3 电化学免疫传感器263

7.3.4 电化学酶免疫传感器265

7.4 光导纤维型酶免疫传感器270

7.4.1 光导纤维型信号转换器的基本原理270

7.4.2 光导纤维型酶传感器271

7.4.3 光导纤维型免疫传感器272

7.4.4 光学酶免疫传感器273

7.5 压电晶体型酶免疫传感器274

7.5.1 压电晶体型信号转换器的基本原理274

7.5.2 压电晶体型酶传感器275

7.5.3 压电晶体型免疫传感器275

7.5.4 压电晶体型酶免疫传感器278

参考文献279