图书介绍

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分子生物学实验指导
  • 刘静主编 著
  • 出版社： 长沙：中南大学出版社
  • ISBN：9787548719618
  • 出版时间：2015
  • 标注页数：287页
  • 文件大小：30MB
  • 文件页数：297页
  • 主题词：分子生物学－实验

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图书目录

分子生物学实验室安全规则1

1．实验室药品试剂使用的注意事项1

2．处理生物类废弃物的基本方法4

3．实验室易制毒化学品5

分子生物学实验室常规设备简介7

1．实验室操作及分析仪器室7

2．离心机室9

3．细胞培养室9

4．细菌培养室10

5．放射性核素操作室11

6．暗室11

7．其他设备12

分子生物学常用实验技术13

1．电泳13

1.1 琼脂糖凝胶电泳13

1.2 聚丙烯酰胺凝胶电泳18

2．哺乳动物外周血白细胞高分子质量DNA的提取26

2.1 硅基质膜吸附柱法26

2.2 NH4Ac-核酸沉淀法28

3．核酸浓度测定31

3.1 紫外线分光光度法（紫外线吸收法）31

3.2 溴乙锭-琼脂糖凝胶电泳法（荧光光度法）32

4．限制性核酸内切酶消化DNA35

5．凝胶电泳回收DNA（柱回收法）40

6．DNA分子的体外连接43

7．感受态细胞制备及大肠埃希菌转化47

8．重组质粒的筛选和鉴定50

8.1 插入失活50

8.2 α互补（蓝-白筛选）51

8.3 酶切鉴定52

9．质粒DNA的提取与纯化（碱裂解法）55

10．Southern印迹杂交58

11．探针标记和核酸分子杂交62

11.1 利用32P标记DNA探针进行核酸分子杂交分析62

11.2 采用地高辛标记DNA探针进行核酸分子杂交分析70

12．细胞总RNA的提取74

12.1 哺乳动物细胞RNA的提取74

12.2 TRIzol试剂提取哺乳动物细胞RNA76

12.3 哺乳动物细胞RNA提取（离心柱型）77

12.4 植物总RNA的提取78

13．Northern印迹杂交80

14．PCR和RT-PCR83

15．实时荧光定量PCR90

16．DNA定点诱变技术96

17．PCR-SSCP分析101

18．细胞蛋白质提取106

18.1 细胞总蛋白提取106

18.2 胞浆、胞核蛋白提取107

19．外源基因在大肠埃希菌中表达和蛋白质纯化109

20．蛋白质浓度测定（BCA法）111

21．蛋白质免疫印迹法114

22．细胞培养119

22.1 细胞原代培养119

22.2 细胞传代培养120

22.3 培养用品的清洗和消毒灭菌123

22.4 细胞计数方法和细胞活力鉴定方法124

23．细胞转染126

23.1 磷酸钙转染法126

23.2 脂质体转染法128

24．细胞增殖检测131

24.1 细胞生长曲线131

24.2 CCK-8测定细胞活力132

24.3 细胞集落形成实验133

25．细胞凋亡检测136

25.1 常规琼脂糖凝胶电泳136

25.2 Annexin-V/PI法检测细胞凋亡139

26．流式细胞术检测细胞周期141

27．细胞划痕实验144

28．细胞Transwell侵袭实验146

29．双荧光素酶服告基因实验148

30．RNA干扰技术151

30.1 siRNA干扰技术151

30.2 慢病毒干扰技术154

31．染色质免疫共沉淀技术（ChIP）157

32．凝胶迁移阻滞实验（EMSA）165

33．DNase Ⅰ足纹分析法173

34．RNA免疫共沉淀（RIP）177

35．蛋白质的相互作用185

35.1 免疫共沉淀185

35.2 酵母双杂交法187

36．GST pull-down实验192

37．细胞免疫荧光染色195

38．免疫组化199

39．激光共聚焦荧光显微镜检测技术202

40．基因启动子区CpG岛预测及甲基化PCR引物设计204

41．甲基化特异性PCR212

42．miRNA的提取和富集216

42.1 常规分离方法216

42.2 硅基质离心柱法219

43．miRNA靶基因的生物信息学预测222

43.1 常用miRNA靶基因预测软件简介222

43.2 预测软件使用227

44．文库构建237

44.1 基因组DNA文库构建237

44.2 cDNA文库构建243

44.3 文库的筛选与鉴定250

45．常用生物信息学数据库257

45.1 常用核酸序列数据库257

45.2 常用蛋白质序列数据库262

46．核酸序列分析268

46.1 序列比对268

46.2 开放阅读框分析271

46.3 限制性核酸内切酶酶切位点分析273

46.4 基序的查找274

46.5 外显子、内含子剪切位点分析275

47．蛋白质序列分析277

47.1 蛋白质的理化性质分析277

47.2 蛋白质的疏水性分析278

47.3 蛋白质的跨膜结构分析280

47.4 信号肽的预测和识别283

47.5 蛋白质的卷曲螺旋预测284

47.6 磷酸化位点的预测与识别285

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