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第一章 膜片钳技术基本概念1

第一节 膜片钳技术概述1

一、什么是膜片钳技术1

目录1

二、膜片钳技术的发展概况3

三、膜片钳技术的基本记录模式5

四、膜片钳技术的应用5

第二节 膜片钳记录系统中的电极11

一、玻璃微电极11

二、Ag/AgCl电极17

三、Pt电极18

四、碳纤电极19

五、常见问题20

一、膜电位22

第三节 膜片钳记录系统中的电压和电位22

二、平衡电位24

三、命令电压25

四、钳制电位26

五、电极电压降27

六、失调电位27

七、浴池电位29

八、常见问题31

第四节 膜片钳记录系统中的电流和电导33

一、跨膜电流33

二、离子通道电导34

三、闸门电流34

四、正电流与负电流34

六、去极化电流与超极化电流35

七、封接电流35

五、内向电流与外向电流35

八、输入漏电流36

九、膜漏电流36

第五节 膜片钳记录系统中的电阻36

一、膜电阻与膜输入阻抗36

二、电极电阻37

三、封接电阻37

四、串联电阻及接入电阻38

五、浴池电阻39

六、漏电阻40

第六节 膜片钳记录系统中的电容40

一、膜电容40

二、分布电容43

三、电极电容43

五、时间常数45

四、快电容与慢电容45

第七节 膜片钳记录系统中的漏减功能47

一、漏电流的概念与特点47

二、Clampex采样软件的P/N漏减功能48

三、Clampex采样软件的定标P/N漏减功能54

四、膜片钳放大器漏减功能56

五、Clampfit处理软件的漏减功能57

六、常见问题60

第八节 膜片钳记录系统中的噪声61

一、噪声的测量指标62

二、噪声的基本类型62

三、膜片钳放大器噪声64

四、电极夹持器噪声65

五、电极噪声65

六、干扰的来源69

七、干扰的排除方法71

八、量化噪声76

九、混叠噪声77

十、常见问题78

第九节 膜片钳记录系统中的信号滤波80

一、有关滤波的几个基本概念80

二、滤波器的基本类型83

三、数码滤波器85

四、采样频率与滤波频率的关系86

五、电干扰滤波器86

六、常见问题87

第二章 膜片钳技术实验方法90

第一节 全细胞记录技术90

一、离子通道简介90

二、全细胞记录要注意的问题91

三、全细胞记录与其他记录技术的比较92

四、电压门控性离子通道的动力学研究93

五、配体门控性离子通道的动力学研究100

第二节 单通道记录技术及其数据分析104

一、单通道记录模式104

二、单通道数据的采集105

三、单通道数据分析中的几个基本概念105

四、单通道数据分析前的处理108

五、单通道事件的检测109

六、单通道电流幅度（电导）的分析110

七、单通道开关的动力学分析113

八、通道开放概率的计算115

九、膜片上通道数目的估算116

十、其他分析119

一、穿孔全细胞记录模式120

第三节 穿孔膜片钳记录技术120

二、穿孔囊泡记录模式124

三、穿孔膜片钳记录模式的实验方法及注意事项125

第四节 巨膜片记录技术126

一、巨膜片记录技术的概念126

二、肌细胞标本制备127

三、玻璃微电极制备128

四、封接的形成128

五、巨膜片电容的测定129

六、巨膜片记录技术的局限129

第五节 其他膜片钳技术方法130

一、膜电容测定法130

二、松散封接记录技术132

三、脂质体记录技术134

五、细胞内灌注与抽吸技术137

四、细胞内膜离子通道记录技术137

六、压力钳技术139

七、在体膜片钳记录技术142

第三章 脑片膜片钳记录技术148

第一节 脑片膜片钳技术研究概况148

一、脑片标本介绍148

二、脑片膜片钳技术研究概况149

第二节 脑片培养技术153

一、脑片培养技术简介153

二、脑片培养方法153

三、培养海马脑片的特点157

四、培养脑片的应用158

第三节 海马的结构160

一、海马的概念160

二、海马结构的细胞构筑162

三、海马结构的主要传出纤维165

五、海马结构的内部纤维联系166

四、海马结构的主要传入纤维166

第四节 脑片振动切片机168

一、脑片切片方法简介168

二、NVSLM1型振动切片机169

第五节 海马脑片盲法膜片钳记录技术171

一、实验设备171

二、溶液配制172

三、海马脑片制备173

四、脑片孵育槽174

五、脑片记录浴槽175

六、玻璃微电极制备175

七、脑片盲法全细胞记录176

第一节 Axoclamp 2B微电极放大器181

一、探头181

第四章 膜片钳放大器及数模／模数转换器181

二、电极夹持器183

三、模型细胞183

四、前后面板184

五、浴池电位的去除191

六、记录模式192

七、接地和交流噪声202

八、电源203

九、常见问题203

第二节 Axopatch 1D膜片钳放大器206

一、探头206

二、电极夹持器210

三、模型细胞211

四、前后面板211

五、噪声220

六、电源221

七、仪器的基本连线222

八、全细胞与单通道记录操作步骤223

九、常见问题226

第三节 Axopatch 200B膜片钳放大器229

一、探头229

二、电极夹持器231

三、模型细胞231

四、前后面板232

五、接地和交流噪声244

六、电源245

七、全细胞与单通道记录操作步骤245

八、常见问题247

第四节 Digidata 1200系列数模／模数转换器250

一、Digidata 1200系列转换器之间的差别251

二、Digidata 1200B前后面板251

三、安装253

四、pClamp采样软件对Digidata 1200系列转换器的确认254

第五节 Digidata 132x系列数模／模数转换器258

一、Digidata 132x系列转换器之间的差别259

二、所需计算机配置259

三、前后面板259

四、安装261

五、pClamp采样软件对Digidata 1200系列转换器的确认263

六、常见问题264

［附］什么是SCSI？265

第五章 膜片钳技术数据采集和处理软件267

第一节 pClamp数据采集和处理软件概述267

一、pClamp简介267

二、pClamp的构成268

三、pClamp的安装和运行269

一、几个名词术语271

第二节 Clampex 8数据采集软件271

二、Clampex 8主要文件类型273

三、Clampex 8采样文件的命名274

四、Clampex 8的窗口275

五、Protocol编辑282

六、Configure设置293

七、Lab Bench没定301

八、Seal Test功能306

九、Membrane Test功能308

十、液接电位的计算与钳制电位的校正311

十一、常见问题315

第三节 Clampfit 8数据处理分析软件318

一、Clampfit 8的窗口318

二、Clampfit 8文件类型320

三、数据的基本处理功能321

五、快速作图325

四、Stimulus Waveform调节325

六、文件的数学运算327

七、拟合328

八、统计分析336

九、常见问题338

第四节 Clampex 9数据采集软件339

一、Clampex 9采样及分析窗口339

二、Protocol编辑340

三、Resistance Test功能341

四、LTP助手（LTP Assistant）344

五、Telegraphed Instrument设置356

六、常见问题357

第五节 Clampfit 9数据处理分析软件358

一、Clampfit 9的窗口358

二、Clampfit 9文件的数学运算359

三、Clampfit 9的单通道数据分析功能361

四、Clampfit 9的自发突触活动分析382

五、Variance-mean分析（V-M分析）388

六、Clampfit 9的阈值检测功能394

七、常见问题396

第六节 Origin数据分析与图形制作软件398

一、如何将pClamp采样数据输入到Origin软件进行处理398

二、如何赋予数据表中各组别的名称与特征398

三、如何对数据表中的数据进行转换400

四、作直条图时的几个问题400

五、如何对数据进行直线回归401

六、如何对坐标轴进行调整401

七、如何对坐标轴做断轴403

八、如何将几个不同的图显示在同一页面上并进行处理404

九、如何对所获数据进行曲线拟合406

十、如何制作Waveform图形409

十一、如何在Origin中剪切输入的采样图形410

十二、如何去除坏点411

十三、如何将制作好的图形输出411

附录413

附录一 膜片钳技术常用单位及换算413

附录二 膜片钳实验溶液中常用离子的化合价与迁移率414

附录三 膜片钳放大器的主要类型及生产厂家415

附寻四 膜片钳技术推荐参考书425

图题与表题426

一、图题426

二、表题433

索引435

一、中文索引435

二、英文索引439