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第一章 医用光学显微镜使用技术1

第一节 概述1

第二节 显微镜的基本结构1

一、光学系统1

二、机械系统1

三、照明部分3

第三节 显微镜的使用与保管3

一、显微镜的调试与使用方法3

二、显微镜的维护、清洁与保管5

第四节 其他常见医用光学显微镜简介5

一、相差显微镜技术5

二、荧光显微镜技术7

第五节 本章实训9

【实训项目一】医用普通光学显微镜的使用9

【实训项目二】倒置相差显微镜的使用10

第二章 玻片标本的制作与染色技术11

第一节 玻片标本的制作11

一、玻片标本类型11

二、常用玻片标本的制作方法12

第二节 玻片标本的染色13

一、染料分类及染色原理13

二、几种常用染料14

三、常用染料的染色方法15

第三节 本章实训17

【实训项目】血液涂片制作及瑞氏染色17

第三章 化学基本操作19

第一节 常用化学实验器材的识别及清洗19

一、常用化学实验器材的识别19

二、几种常用清洁液的配制和应用19

三、玻璃仪器清洗方法24

第二节 常用量器的使用25

一、托盘天平的使用25

二、吸量管、移液管的使用25

三、容量瓶的校准与使用方法27

第三节 固体与液体物质的量取29

一、粉末状固体药品的取用29

二、块状固体药品的取用29

三、液体药品的取用29

第四节 试剂的配制方法及质量保证30

一、化学试剂的规格30

二、各种浓溶液的配制方法及质量保证31

第五节 物质的溶解、过滤和蒸发32

一、溶解32

二、过滤32

三、蒸发32

第六节 分析天平的使用33

一、分析天平的分类33

二、分析天平的结构33

三、分析天平的称量方法33

四、称量练习36

第七节 玻璃工操作和塞子钻孔37

一、玻璃工操作37

二、塞子钻孔38

第八节 本章实训39

【实训项目一】氯化钠的提纯39

【实训项目二】分析天平的使用41

第四章 离心技术42

第一节 离心分离原理42

一、基本原理42

二、离心力42

三、相对离心力42

四、沉降速度43

五、沉降系数43

六、沉降时间（离心时间）43

第二节 离心机的分类及用途43

一、离心机的分类43

二、离心机的基本结构44

三、离心技术在医学实验中的应用44

第三节 常见离心机的操作程序及注意事项45

一、普通低速离心机的操作程序45

二、微量台式高速离心机的操作程序46

三、LG10-2.4A型高速离心机操作程序47

四、Beckman冷冻离心机操作程序48

第四节 本章实训50

【实训项目】血清标本的分离与储存50

第五章 电泳技术52

第一节 电泳的基本原理及用途52

一、基本原理52

二、几种电泳技术的用途53

第二节 电泳装置的组成53

一、电泳仪（直流电源）54

二、电泳槽55

第三节 本章实训55

【实训项目一】醋酸纤维素薄膜电泳分离血清蛋白质55

【实训项目二】琼脂糖凝胶电泳分离DNA57

第六章 分光光度技术60

第一节 基本原理及用途60

一、分光光度计的基本原理60

二、分光光度计的应用61

第二节 分光光度计的基本构成62

一、光源62

二、单色器63

三、吸收池63

四、检测器63

五、信号显示系统64

第三节 几种常见分光光度计的使用64

一、721分光光度计的基本操作64

二、722分光光度计的基本操作64

三、UV-730紫外-可见分光光度计的基本操作65

第四节 本章实训66

【实训项目一】Spectrumlab 22 PC分光光度计的使用及硫氰酸汞比色法测定血清氯化物66

【实训项目二】UV-730紫外-可见分光光度计的使用及硫氰酸汞比色法测定血清氯化物68

第七章 蛋白质分离纯化技术简介71

第一节 蛋白质分离纯化的一般程序71

第二节 材料选择及前处理71

一、材料的选择71

二、组织和细胞的破碎方法72

第三节 蛋白质粗分离方法73

一、盐析法73

二、等电点沉淀法74

三、低温有机溶剂沉淀法74

第四节 蛋白质的进一步纯化74

一、凝胶过滤层析法75

二、离子交换层析法75

三、亲和层析法75

第五节 本章实训76

【实训项目】盐析法纯化免疫球蛋白76

第八章 层析技术79

第一节 概述79

一、层析技术的分类79

二、层析法的基本原理80

第二节 层析参数80

一、层析流出曲线80

二、保留值81

第三节 几种常用层析法82

一、离子交换柱层析法82

二、凝胶柱层析法83

三、亲和层析法84

四、薄层层析法84

第四节 本章实训88

【实训项目一】离子交换层析法测定血液样品中糖化血红蛋白含量88

【实训项目二】葡聚糖SephadexG-150分离血清蛋白质89

【实训项目三】薄层层析法分析食品中的着色剂91

第九章 动物免疫血清制备94

第一节 免疫原的制备94

一、免疫原的制备94

二、免疫佐剂的制备94

第二节 动物免疫接种及抗血清制备95

一、动物免疫接种95

二、动物抗血清的采集96

三、抗血清的分离96

第三节 抗体的纯化、鉴定及保存96

一、抗体的纯化和鉴定96

二、抗体的保存97

第四节 本章实训97

【实训项目一】绵羊红细胞抗原及免疫血清制备97

【实训项目二】动物免疫血清的鉴定和保存99

第十章 核酸的分离纯化技术101

第一节 核酸分离纯化技术的基本原则101

第二节 苯酚／氯仿抽提DNA的原理及要求102

一、核酸提取的主要步骤102

二、苯酚／氯仿抽提DNA的原理103

三、试剂配制要求及作用103

第三节 碱变性法提取质粒DNA103

一、提取DNA的目的103

二、碱裂解法原理104

三、主要试剂及作用104

四、碱变性抽提质粒DNA的主要步骤104

第四节 真核细胞总RNA的提取105

一、异硫氰酸胍／苯酚／氯仿抽提法分离总RNA的原理105

二、抑制RNA酶的活性105

第五节 核酸定量技术105

一、核酸定量方法及原理105

二、分光光度法测定核酸浓度的方法106

第六节 本章实训107

【实训项目一】大肠杆菌染色体DNA的分离纯化107

【实训项目二】碱变性法小量提取PUC质粒109

【实训项目三】一步法提取培养的真核细胞总RNA111

第十一章 无菌技术113

第一节 消毒与灭菌技术113

一、消毒与灭菌概念113

二、常用的消毒灭菌方法114

第二节 无菌操作118

一、无菌器材118

二、无菌操作环境119

三、无菌操作方法120

第十二章 细胞培养技术121

第一节 细胞培养室的布局要求121

一、无菌操作室121

二、缓冲室121

三、准备室122

第二节 细胞培养的一般程序122

一、准备工作122

二、取材124

三、传代细胞培养125

四、细胞的冻存与复苏127

主要参考文献129